
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
人結腸間質細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
結腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
梭形細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1322
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于術后的結腸組織。
2)細胞鑒定:c-kit熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 間質 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
消化道 Cajal間質細胞因分布于管壁的不同層面而被相應命名,不同區(qū)域的Cajal間質細胞有不同的結構和功能。
Cajal間質細胞以網絡狀分布在消化道腸神經系統(tǒng)末梢與平滑肌細胞之間的一類特殊細胞。腸道運動功能的產生和維持是Cajal間質細胞、腸神經系統(tǒng)以及平滑肌細胞三者協(xié)同作用的結果。間質細胞不僅能自發(fā)產生節(jié)律性慢波,而且能介導腸神經系統(tǒng)與平滑肌間的信號調節(jié)。
公司正在出售的產品:
小鼠肉毒堿乙酰轉移酶(CRAT)elisa檢測試劑盒
小鼠白細胞介素1受體拮抗劑(IL-1RA)elisa檢測試劑盒
Ca++Mg++ ——ATP酶測試盒
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粘著斑蛋白(vinculin)熒光染色試劑盒
雞白介素12(IL-12/70)elisa分析檢測試劑盒
6%蛋白電泳分離預制膠溶液
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血小板活化因子受體抗體 PAFR/PAF Receptor
液泡蛋白分選受體SORCS2抗體 SORCS2
低密度脂蛋白受體相關蛋白3抗體 LRP3
短鏈脫氫酶/還原酶SDRO抗體 SDR-O
FITC標記人CD35單克隆抗體 human CD35/FITC
FLYWCH2蛋白抗體 FLYWCH2
硫氧還蛋白5抗體 TXNDC5
球蛋白j鏈抗體 JCHAIN
4號染色體開放閱讀框32抗體 C4orf32
8號染色體開放閱讀框192抗體 C6orf192
即刻早期基因ARC抗體 ARC
鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員7抗體 KCNA7
RAS互動/干擾蛋白1抗體 RIN1
RPS27A抗體 RPS27A
死亡結構域蛋白NRH2抗體 NRH2
糖原合酶激酶-3β單克隆抗體 [KO驗證抗體] GSK-3 Beta
大鼠載脂蛋白C1(APOC1)elisa檢測試劑盒
人結腸間質細胞Donkey Anti-Human IgG H&L / PE-Cy5
卵泡抑素相關蛋白5抗體
C15orf19; C18B11; C18B11 homolog; RNA pseudouridylate synthase domain containing 2; RNA pseudouridylate synthase domain containing protein 2; RNA pseudouridylate synthase domain-containing protein 2; RPUSD 2; RPUSD-2; RUSD2_HUMAN.
人結腸間質細胞
人臍靜脈內皮細胞
人結直腸癌細胞;P53R (STR)
NCI-H226人肺鱗癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。