
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
人結腸粘膜上皮細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
結腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
上皮樣 多角形細胞
分類
人原代細胞
貨號
A01X1292
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于手術切除的正常結腸組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:上皮樣,多角形細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代上皮細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸,在第 3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母M,將小腸包圍在內。
結腸橫切面由內到外依次為:粘膜(上皮層,固有層,粘膜肌層),粘膜下層,肌層,外膜。其中上皮細胞主要位于粘膜層的上皮層,為單層柱狀上皮 ,含較多的杯狀細胞。結腸粘膜內有杯狀細胞,可分泌堿性液體,保護結腸粘膜,潤滑大便,以助排便。
公司正在出售的產品:
人并殖吸蟲抗體(IgM)elisa檢測試劑盒
LHX8蛋白抗體
LHX8
CROC4抗體
CROC4
糖血清蛋白(GSP)酶連續(xù)反應比色法定量檢測試劑盒
雞雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒
蛋白電泳麗春紅染色試劑盒
小鼠甘露糖受體C1(MRC1)elisa檢測試劑盒
軸索過度生長抑制因子B受體抗體
Nogo B receptor
通用轉錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體
GTF2A1 alpha
磷酸化白細胞介素1受體銜接蛋白抗體 Anti-phospho-TIRAP(Tyr86)
磷酸化蛋白激酶樣內質網激酶抗體 Anti-Phospho-PERK(Thr980)
穿孔素抗體 Anti-Perforin
細胞粘附分子伴侶蛋白2抗體 Anti-Sidekick 2
磷酸化心臟磷蛋白抗體
phospho-PLB (Thr17)
嗅覺受體5AR1抗體
OR5AR1
野生型P53誘導基因1抗體 Anti-WIG-1/PAG608
神經元特異性蛋白家族成員2抗體 Anti-NSG2/HMP19
環(huán)指蛋白24抗體 Anti-RNF24
SH2結構含磷酸肌醇SHIP1抗體 Anti-SHIP1
大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa分析檢測試劑盒
人結腸粘膜上皮細胞Rabbit Anti-Monkey IgG H&L / Cy5
酸性核糖體磷蛋白P2抗體
BMPR-1A; Activin A receptor type II like kinase 3; Activin receptor like kinase 3; ACVRLK 3; ACVRLK3; ALK 3; ALK3; BMPR 1A; Bmpr; Bone morphogenetic protein receptor type IA; Bone morphogenetic protein receptor type IA precursor; BR 1a; BR1a; CD 292; CD292; CD292 antigen; EC 2.7.11.30; Serine threonine protein kinase receptor R5; Serine threonine protein kinase receptor R5 precursor; SKR 5; SKR5; zBMPR IA; zBMPRIA.
人結腸粘膜上皮細胞
人臍動脈內皮細胞
SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13 (STR)
NCI-H2291人非小細胞肺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。