培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀(guān)察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
關(guān)節(jié)滑膜組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
成纖維樣細(xì)胞
分類(lèi)
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1409
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來(lái)源于手術(shù)取得的患類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病人的關(guān)節(jié)滑膜組織。
2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：成纖維樣細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤(rùn)，由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu)，除關(guān)節(jié)軟骨、半月軟骨板以外 ,即便是通過(guò)關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。
滑膜分泌滑液，在關(guān)節(jié)活動(dòng)中起重要作用。正?；し譃閮蓪?，即薄的細(xì)胞層 (內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層)，是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜，貼附于非關(guān)節(jié)面部分，覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱(chēng)為邊緣區(qū)或裸區(qū)?；こ史奂t色，光滑發(fā)亮、濕而潤(rùn)滑，有時(shí)可見(jiàn)絨毛，內(nèi)含膠原性纖維。
滑膜細(xì)胞有 A、B兩型。巨噬細(xì)胞樣A型細(xì)胞，表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠E-鈣粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)elisa檢測(cè)試劑盒
人堿性磷酸酶(ALP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
通用型人體鼻病毒（rhinovirus）定性檢測(cè)試劑盒
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大鼠神經(jīng)肽Y(NPY)elisa檢測(cè)試劑盒
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鹽析法大量蛋白濃縮沉淀試劑盒
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DENND1A蛋白抗體 DENND1A
DNA修復(fù)蛋白Rad50抗體 RAD50
磷酸化蛋白激酶C α/β2重組兔單克隆抗體 Phospho-PKC alpha (Thr638)
磷酸化接頭蛋白Gab 1抗體 Phospho-Gab1 (Tyr627)
胞粘蛋白2抗體 Cytohesin 2
補(bǔ)體因子B抗體 Factor B
線(xiàn)粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 Mitoferrin 2/SLC25A28
心肌肌鈣蛋白抗體 Cardiac Troponin I/TNNC1
NUDT10蛋白抗體 NUDT10
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD62L單克隆抗體 mouse CD62L/Pacific Blue
上皮粘連調(diào)控蛋白ESRP2抗體 ESRP2
神經(jīng)細(xì)胞分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體 AHNAK
核仁蛋白14抗體 Nucleolar protein 14
核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體 SOX14
軸突導(dǎo)向因子SEMA3E抗體 Semaphorin 3E
轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SEC24A抗體 SEC24A
大鼠骨鈣素(OT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy3
鋅指蛋白909抗體
Blood group Rh(CE) polypeptide; Blood group RhCcEe antigen; CD240CE; CD240CE antigen; RH; Rh blood group antigen Evans; Rh blood group C antigen; Rh blood group, CcEe antigens; Rh polypeptide 1; Rh polypeptide I; RH30A; Rh4; RHC; RHCE blood group variant Crawford antigen Rh43; RHE; Rhesus blood group CE protein; Rhesus blood group E antigen; Rhesus blood group Rhce antigen; Rhesus blood group, CcEe antigens; Rhesus C/E antigens; Rhesus system C and E polypeptides; RhIVb(J); RHIXB; RHPI; RhVI; RhVIII; RHCE_HUMAN.
人類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞
人脾成纖維細(xì)胞
人食管癌細(xì)胞；TE-13 (STR)
NCI-H292人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。