培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
眼組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長梭形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號
A01X1476
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于人的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：長梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
脈絡(luò)膜新生血管 (choroidal neovascularization，CNV)已成為眼科學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一，在血管外側(cè)有結(jié)締組織，結(jié)締組織是由成纖維細(xì)胞構(gòu)成，起到支持和保護(hù)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
/酵母細(xì)胞線粒體分離（高純）試劑盒
KIAA1751蛋白抗體
KIAA1751
抗1A抗體
AVPR1A
大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體β(PPAR-B/PPARD)elisa分析檢測試劑盒
酵母蛋白提取試劑盒50T
人高敏甲狀腺素(u-T4)elisa分析檢測試劑盒
大鼠腎上腺髓質(zhì)素（AM）基因重組表達(dá)載體（pGEFP-AM）
NCK銜接蛋白1/2抗體
NCK adaptor protein 1/2
5號染色體開放閱讀框48抗體
C5orf48
四分子交聯(lián)體20抗體（四旋蛋白） Anti-TSPAN20/UPIb
多效生長因子抗體 Anti-PTN/Pleiotrophin
抗細(xì)胞凋亡蛋白OLFM44抗體 Anti-OLFM4
糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激酶1抗體 Anti-SGK1
組蛋白H3樣蛋白抗體
Centromeric histone H3-like protein-1
金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體
DMT1
液泡分選蛋白4抗體 Anti-VPS4a
鈉氫通道蛋白抗體 Anti-NHE1/APNH1
環(huán)指蛋白121抗體 Anti-RNF121
腫瘤壞死因子配體超家族成員15抗體 Anti-TNFSF15/TL1A
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)elisa分析檢測試劑盒
人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞Mouse Anti-Goat IgG H&L / HRP
組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD4抗體
A-kinase anchor protein 550; d AKAP 550; Neurobeachin protein; Rugose protein; AKAP550; NBEA_DROME.
人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞
人膀胱上皮細(xì)胞
人結(jié)腸癌細(xì)胞帶熒光素酶；HT-29/LUC (STR)
NCI-H358人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。