培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人腦微血管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1513
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于人腦組織。
2)細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 平滑肌 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
血管發(fā)生和發(fā)展的一個(gè)主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞（ smooth
muscle cells, SMCs）轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細(xì)胞能表達(dá)鈣離子通道，ICAM-1和VCAM-1。
其中 ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)可能是造成血管壁炎癥反應(yīng)，并進(jìn)一步造成血管的原因。因此，對血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鋱鹽（terbiumIII）單鏈DNA熒光定量測定試劑盒
體液羥賴（HYL）含量比色法定量檢測試劑盒
人球蛋白A（IgA）elisa檢測試劑盒
大鼠甲狀旁腺相關(guān)蛋白(PTHrP)elisa分析檢測試劑盒
豬骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa分析檢測試劑盒
豚鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)elisa分析檢測試劑盒
酵母菌SD-LEU培養(yǎng)基
魚球蛋白M(IgM)elisa檢測試劑盒
大鼠松弛素relaxin,RLNelisa檢測試劑盒
神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 Neurturin
食道癌相關(guān)基因NMES1抗體 NMES1
NSUN5P1蛋白抗體 NSUN5P1
Pacific Blue標(biāo)記小鼠CD117單克隆抗體 mouse CD117(c-Kit)/Pacific Blue
轉(zhuǎn)錄因子Sox3抗體 Sox3
組氨酸氨酶HAL抗體 Histidase
核孔復(fù)合體蛋白88抗體 NUP88
核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 NFAT1
鋅指蛋白342抗體 ZNF342
鋅指蛋白720抗體 ZNF720
補(bǔ)體C1qα鏈多肽抗體 C1QA
成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤基因抗體 Rb
DNA聚合酶β抗體 DNA Polymerase beta
ECSIT蛋白抗體 ECSIT
磷酸化紅細(xì)胞膜帶4.9蛋白抗體 phospho-Dematin (Ser403)
磷酸化細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白樣蛋白3抗體 phospho-ARP3 (Ser418)
小鼠鐵調(diào)素(Hepc)elisa檢測試劑盒
人腦微血管平滑肌細(xì)胞小鼠白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)elisa檢測試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)elisa檢測試劑盒
Aldose 1 epimerase; Aldose 1-epimerase; BLOCK25; Galactomutarotase; Galactose mutarotase; Galm; GALM_HUMAN; IBD1.
人腦微血管平滑肌細(xì)胞
人內(nèi)皮祖細(xì)胞
急性髓系白血病細(xì)胞；SKM-1
NCI-H520人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。