
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
腦組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
圓形或橢圓形細(xì)胞
分類(lèi)
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1507
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于人的正常腦組織。
2)細(xì)胞鑒定:MBP熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:圓形或橢圓形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 少突膠質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
少突膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)中膠質(zhì)細(xì)胞的重要組成部分,其主要功能是包繞神經(jīng)元的軸突形成髓鞘,協(xié)助神經(jīng)電型號(hào)的跳躍式高效傳遞,維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能。
此外,少突膠質(zhì)細(xì)胞還具有合成和分泌多種細(xì)胞因子來(lái)促進(jìn)神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育和存活等功能。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)elisa檢測(cè)試劑盒
組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶KAT7抗體
KAT7
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白抗體
ARFBP1
內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE2抗體 Anti-SCUBE2
磷酸化G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子19抗體 Anti-phospho-RGS19(Tyr143)
環(huán)指蛋白67抗體 Anti-NEURL/RNF67
鋅指蛋白3抗體 Anti-ZNF3
肌肉相關(guān)卷曲螺旋蛋白抗體
MURC
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體
C2orf50
三核苷酸重復(fù)蛋白6B抗體 Anti-TNRC6B
磷酸化蛋白酶體PSMβ7抗體 Anti-phospho-Proteasome 20S beta 7(Ser214)
醌氧化還原酶抗體 Anti-NQO1
超氧化物歧化酶1抗體(銅/鋅過(guò)氧化物歧化酶SOD) Anti-SOD1/SOD
EOS蛋白抗體
ZNFN1A4
狄喬治(DiGeorge)氏綜合征相關(guān)蛋白8抗體
DGCR8
轉(zhuǎn)錄抑制蛋白Sin3b抗體 Anti-Sin3b
磷酸化核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 Anti-Phospho-NuMA (Ser395)
RAS蛋白樣激活劑1抗體 Anti-RASAL1
腫瘤壞死因子C/β抗體 Anti-TNFC/lymphotoxin Beta
大鼠對(duì)氧磷酶1(PON1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人少突膠質(zhì)細(xì)胞Rabbit Anti-Mouse Kappa light chain / Gold
鋅指蛋白445抗體
PAP beta; PAP-beta; PAPT; poly(A) polymerase beta (testis specific); poly(A) polymerase beta; polynucleotide adenylyltransferase beta; TPAP.
人少突膠質(zhì)細(xì)胞
人結(jié)膜下囊成纖維細(xì)胞
人舌鱗癌細(xì)胞;UPCI:SCC154
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。