培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
人食管纖維瘤細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
食管腫瘤組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
長(zhǎng)梭形
分類
人原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1312
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）細(xì)胞來源于人食管腫瘤組織。
2）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
3）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
食管纖維瘤來源于食管肌層，多數(shù)位于食管下段，腫瘤體硬，呈膨脹性生長(zhǎng)。一般病程較長(zhǎng)，數(shù)月直數(shù)年不等，為常見的良性食管腫瘤，多發(fā)性。體外分離和培養(yǎng)食管纖維瘤細(xì)胞，為研究食管纖維瘤生物學(xué)特性、機(jī)理等奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠高香草酸(HVA)elisa檢測(cè)試劑盒
α-酮戊二酸含量測(cè)試盒
小鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
雞分泌型球蛋白A(SIgA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
組織鋰（lithium）化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒
分泌和跨膜蛋白1抗體 Anti-SECTM1
磷酸化細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體 Anti-Phospho-Rad17 (Ser645)
NADPH氧化酶活化蛋白1抗體 Anti-NOXA2/p67phox
受精卵抑制蛋白1抗體 Anti-ZAR1/Zygote arrest protein 1
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體 SMAD1
限制過度增殖相關(guān)蛋白EML4抗體 EML4
α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗體 AMACR
δ樣蛋白4抗體 DLL4
ATP依賴解旋酶ERCC6抗體 CSB
B細(xì)胞鏈接激活蛋白抗體 NTAL
辣椒素受體抗體 TRPV1
鏈霉素抗體 streptomycin
中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體 MIER2
腫瘤抑制基因LPP2抗體 VANGL1
干擾素α2b抗體 Interferon alpha 2b
孤兒核受體抗體 RORC
KMT5A單克隆抗體 KMT5A
MAP7D3蛋白抗體 MAP7D3
染色質(zhì)組裝因子1P55抗體 CAF1p55/VPRBP
溶質(zhì)載體家族蛋白30成員A9抗體 SLC30A9
細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
人食管纖維瘤細(xì)胞Rabbit Anti-Goat IgM / Cy5.5
PRRC2B蛋白抗體
EPDR; Ependymin related protein 1 (zebrafish); Mammalian ependymin related protein 1; MERP 1; MERP1; UCC1; Upregulated in colorectal cancer gene 1.
人食管纖維瘤細(xì)胞
人甲狀腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞；HEK-293
OP9小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。