
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔結(jié)膜囊成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
眼球。
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2235
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的眼球。
2)細胞鑒定:結(jié)蛋白(Desmin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
結(jié)膜為一層薄而透明的粘膜組織,覆蓋在眼瞼后面和眼球前面,分瞼結(jié)膜、球結(jié)膜、穹窿部結(jié)膜。由結(jié)膜形成的囊狀間隙分為結(jié)膜囊。
公司正在出售的產(chǎn)品:
CIAPELISAKit
大鼠γ分泌酶elisa分析檢測試劑盒
Rat γ-secretase ELISA kit
人紅細胞**素(EPO)elisa分析檢測試劑盒
EPOELISAKit
組蛋白H4-K12乙酰化檢測試劑盒
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大鼠Apelin(APLN)elisa分析檢測試劑盒
小鼠膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)elisa檢測試劑盒
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植物細胞周期M期步(SYNCHRONY)處理試劑盒
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細胞糖胺多糖(GAG)總含量阿爾新藍(alcian blue)比色法定量檢測試劑盒
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P53誘導(dǎo)細胞凋亡抑制蛋白抗體
NME5
第8號染色體開放閱讀框78抗體
C8orf78
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體 Anti-TNFAIP3 interacting protein 3/ABIN3
磷酯酶Cγ1抗體 Anti-PLCG 1/PLC gamma 1
多聚合酶α抗體 Anti-PAPOA
抑制Hh信號通路蛋白SUFU抗體 Anti-SUFU/Suppressor of Fused
羅丹明標記的兔抗犬IgM抗體
兔結(jié)膜囊成纖維細胞BMP-2 ELISA Kit
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa分析檢測試劑盒
Aeg 2; Aeg2; CRIS3_HUMAN; CRISP 3; CRISP-3; Crisp3; CRS 3; CRS3; Cysteine rich secretory protein 3; Cysteine-rich secretory protein 3; SGP 28; SGP28; SGP28 protein; Specific granule protein (28 kDa); Specific granule protein of 28 kDa.
兔結(jié)膜囊成纖維細胞
人DC細胞
EoL-1人白血病細胞
SK-LU-1人低分化肺腺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。