培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
頸動(dòng)脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2027
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）或血管假性血友病因子（vWF）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
頸動(dòng)脈存在于脊椎動(dòng)物頸部的動(dòng)脈。有頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈，前者分布至頭頂部和顏面部，后者進(jìn)入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。
內(nèi)皮細(xì)胞層是血液和其它組織的天然屏障。內(nèi)皮細(xì)胞功能病變是造成動(dòng)脈粥樣硬化的主要原因。內(nèi)皮細(xì)胞同時(shí)會(huì)合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的增強(qiáng)和抑制物，以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們同時(shí)也會(huì)分泌控制細(xì)胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。
內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應(yīng)TNF-α，繼而分泌細(xì)胞因子GM-CSF，表達(dá)ICAM-1表面抗體，產(chǎn)生大量的一氧化氮和endotheli???
公司正在出售的產(chǎn)品：
人干擾素活化基因205(Ifi205)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LCK相互作用膜蛋白抗體
LIME
絨毛膜絨毛體催乳素樣蛋白1抗體
CSHL1
組蛋白H3-K23乙?；瘷z測(cè)試劑盒
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大鼠CXC趨化因子受體4(CXCR4)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
核仁結(jié)構(gòu)域蛋白NOM1抗體
NOM1
通用轉(zhuǎn)錄因子2H亞基3/TTFIIH p34抗體
GTF2H3
四分子交聯(lián)體14抗體（四旋蛋白） Anti-TSPAN14
磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 Anti-Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr771)
磷酸化泌乳素抗體 Anti-phospho-PRL (Ser163)
突觸結(jié)合蛋白12抗體 Anti-Synaptotagmin XII
磷酸化著絲粒蛋白A
Phospho-CENPA (Ser7)
嗅覺受體5AU12抗體
OR5B12
原癌基因WIP1抗體 Anti-WIP1/PPM1D
磷酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體 Anti-phospho-NUDC(Ser326)
環(huán)指蛋白123抗體 Anti-RNF123
睪丸凋亡基因抗體 Anti-SRG11/Spata17
大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa分析檢測(cè)試劑盒
兔頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Rabbit IgG / AF680
HDHD1蛋白抗體
BMP antagonist 2; CKTSF1B2; Cysteine knot superfamily 1; Cysteine knot superfamily 1 BMP antagonist 2; DAN domain family member 3; DAND 3; DAND3; GREM 2; Grem2; GREM2_HUMAN; Gremlin 2; Gremlin 2 cysteine knot superfamily homolog; Gremlin-2; Gremlin2; PRDC; Protein related to DAN and cerberus.
兔頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
牛骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞
COV644人卵巢癌細(xì)胞
SK-MEL-28人黑素瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。