
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
兔卵巢表面上皮細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
圓形、卵圓形或多角形細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2122
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常卵巢組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-19(CK-19)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:圓形、卵圓形或多角形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
大約 85%的卵巢癌來源于卵巢表面上皮,它的發(fā)生是一個多因素作用、多基因參與、經過多個階段才終形成的及其復雜的生物學過程。因此,體外培養(yǎng)卵巢表面上皮細胞為研究卵巢表面上皮的功能及其逐步癌變過程對卵巢癌的防治起著重要作用。此外,有研究表明,表皮生長因子對卵巢表面上皮細胞的生長和狀態(tài)十分有益。
公司正在出售的產品:
人游離膽固醇(fCHOL)elisa檢測試劑盒
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醋酸阿托西班抗體 Atosiban, Acetate
E3泛素連接酶MUL1抗體 MUL1
ESF1蛋白抗體 ESF1
磷酸化蓬亂蛋白2抗體 phospho-Dishevelled 2 (Thr224)
磷酸化細胞核受體Rev-Erbα抗體 Phospho-NR1D1 (Ser55 + Ser59)
組蛋白去乙酰化酶7抗體 HDAC7
17-β-羥脫氫酶6抗體 HSD17B6
紅細胞分化相關基因蛋白抗體 Hemogen
環(huán)指蛋白74抗體 RNF74
PE-Cy5標記小鼠CD45RB單克隆抗體 mouse CD45RB/PE-Cy5
PE標記人CD26單克隆抗體 human CD26/PE
神經粘蛋白抗體 Neurocan
絲氨酸蛋白酶38抗體 Marapsin2/PRS38
蔗糖含量測試盒
兔卵巢表面上皮細胞小鼠NAD依賴性蛋白脫乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)elisa檢測試劑盒
大鼠血小板激活因子(PAF)elisa檢測試劑盒
Fibronectin-like domain containing leucine rich transmembrane protein 1; Fibronectin-like domain-containing leucine-rich transmembrane protein 1; FLRT1; FLRT1_HUMAN; Leucine rich repeat transmembrane protein FLRT1; Leucine-rich repeat transmembrane protein FLRT1.
兔卵巢表面上皮細胞
雞氣管上皮細胞
COLO 829人黑素瘤細胞
SK-MEL-5人黑素瘤細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。