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解決qPCR無Ct信號出現(xiàn)現(xiàn)象
日期：2025-05-02 21:12
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摘要：
解決qPCR無Ct信號出現(xiàn)現(xiàn)象：
1、反應循環(huán)參數(shù)不夠，一般要在35個循環(huán)以上，但是過多的循環(huán)次數(shù)可增加背景值。
2、檢測熒光信號的步驟有誤。SYBRgreen法（SG法）采用的是72延伸時采集熒光信號，taqman法則是在退火結束或延伸結束時進行信號采集。
3、引物或探針降解，可用PAGE電泳檢測其完整性，若是電泳條帶呈彌散狀，可考慮重新合成引物或探針。
4、模板不足或降解，則可以重新提取核酸模板。
解決qPCR無Ct信號出現(xiàn)現(xiàn)象：
1、反應循環(huán)參數(shù)不夠，一般要在35個循環(huán)以上，但是過多的循環(huán)次數(shù)可增加背景值。
2、檢測熒光信號的步驟有誤。SYBRgreen法（SG法）采用的是72延伸時采集熒光信號，taqman法則是在退火結束或延伸結束時進行信號采集。
3、引物或探針降解，可用PAGE電泳檢測其完整性，若是電泳條帶呈彌散狀，可考慮重新合成引物或探針。
4、模板不足或降解，則可以重新提取核酸模板。