
胎牛血清在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)注意事項(xiàng)
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、ji素、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
1、注意避免沉淀加入培養(yǎng)液
添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。
2、注意解凍的方法
再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來(lái),便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外采用國(guó)際通用的解方式解凍血清。
3、注意血清的滅活方法
胎牛血清的滅活,一般是用水浴加熱的方式來(lái)加熱已經(jīng)完全解凍的血清,那么需要注意的是,加熱的過(guò)程中一定要規(guī)則地將血清搖晃均勻。而之所以這么做,是為了能夠讓血清中的補(bǔ)體成分去活化。不過(guò)胎牛血清的滅活并不是強(qiáng)制的要求,客戶可以自行選擇是否進(jìn)行滅火處理。