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細胞培養(yǎng)過程
日期:2025-05-04 09:14
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摘要:細胞培養(yǎng)過程
將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng),則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部,幾個小時后組織塊可貼牢在底部,再加入培養(yǎng)基。如系細胞培養(yǎng),一般應在接入培養(yǎng)器皿之前進行細胞計數(shù),按要求以一定的量(以每毫升細胞數(shù)表示)接入培養(yǎng)器皿并直接加入培養(yǎng)基。細胞進入培養(yǎng)器皿后,立即放入培養(yǎng)箱中,使細胞盡早進入生長狀態(tài)。
正在培養(yǎng)中的細胞應每隔一定時間觀察一次,觀察的內(nèi)容包括細胞是否生長良好,形態(tài)是否正常,有無污染,培養(yǎng)基的PH 是否太酸或太堿(由酚紅指示劑指示),此外對培養(yǎng)溫度和CO2 濃度也要定時檢查。
一般原代培養(yǎng)進入培養(yǎng)后有一段潛伏期(數(shù)小時到數(shù)十天不等),在潛伏期細胞一般不分裂,但可貼壁和游走。過了潛伏期后細胞進入旺盛的分裂生長期。細胞長滿瓶底后要進行傳代培養(yǎng),將一瓶中的細胞消化懸浮后分至兩到三瓶繼續(xù)培養(yǎng)。每傳代一次稱為“一代"。二倍體細胞一般只能傳幾十代,而轉(zhuǎn)化細胞系或細胞株則可無限地傳代下去。轉(zhuǎn)化細胞可能具有惡性性質(zhì),也可能僅有不死性(Immortality)而無惡性。培養(yǎng)正在生長中的細胞是進行各種生物醫(yī)學實驗的良好材料。