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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:肺吸蟲PCR檢測試劑盒

  • 產(chǎn)品型號:FS-P63780
  • 產(chǎn)品**:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
肺吸蟲PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
詳情介紹:

產(chǎn)品及特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供病毒樣品。
2. 根據(jù)保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:肺吸蟲PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P63780
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
運輸及保存
低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。

實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

5-羥基色氨酸(標準品) 5-HTP 895096 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%,標準品,L構(gòu)型

五味子醇甲(標準品) Schisandrol A 7432-28-2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品

鹽酸利托君 Ritodrine HCl 23239-51-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

小量質(zhì)粒抽提試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20/50/100次

乙酸鎳四水(>98%,BC) Nickel (II) acetate, tetrahydrate 6018-89-9 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC

血液逆轉(zhuǎn)錄酶(REVERSE TRANSCREPTASE)活性熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

卡培他濱-2',3'-環(huán)狀碳酸酯 Capecitabine-2',3'-cyclic Carbonate 921769-65-5 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

 冰凍切片組織IGF 蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

 冰凍切片組織IL蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次

庚二酸(>98%,BR) Pimelic acid 111-16-0 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

撲熱息痛/對乙酰氨基酚 Paracetamol(Acetaminofen polvo) 103-90-2 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR

組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次

1-甲基-1,2,4-三唑 1-METHYL-1,2,4-TRIAZOLE 6086-21-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%

全反式甲酯視黃酸 all-trans Retinoic Acid Methyl Ester 339-16-2 質(zhì)量規(guī)格:美國進口

PDGF-A蛋白共沉淀分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次

 GSK-3ALPHA蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次

肺吸蟲PCR檢測試劑盒變形桿成套生化鑒定管(BXWS) 英文名稱:BXWS 產(chǎn)品規(guī)格:13種*1套/盒*10盒 產(chǎn)品用途:用于變形桿的生化鑒定用于變形桿的生化鑒定每盒包括:尿素1支、苯丙氨酸酶1支、西蒙氏枸櫞酸鹽1支、鳥氨酸脫羧酶1支、氨基酸脫羧酶對照1支、明膠1支、脂酶(玉米油) 1支、D-甘露醇1支、色氨酸肉湯(蛋白胨水)1支、麥芽糖1支、木糖1支、水楊苷1支、七葉苷水解1支、共13種生化鑒定管并含無液體石蠟1支。

創(chuàng)傷弧成套生化鑒定管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:9種*2套/盒*5盒 產(chǎn)品用途:用于創(chuàng)傷弧生化鑒定1、實驗準備:從包裝盒中取出安瓿瓶,用砂輪在瓶頸上劃一圈,朝易折點(瓶頸上方藍點),反方向用力折開安瓿瓶,插入安瓿瓶試管架中。如果染或變色,則不能使用,重新拿一支。2、接種方法:從選擇性瓊脂平板(mCPC或CC平板)上挑取三個或以上可疑落,劃線接種到3%氯鈉胰蛋白胨大豆瓊脂平板進行純化培養(yǎng)(36±1℃培養(yǎng)18-24h),取純化落做氧化酶試驗和接種3%氯鈉三糖鐵瓊脂、嗜鹽性試驗、3%氯鈉賴氨酸脫羧酶、3%氯鈉氨基酸脫羧酶對照、3%氯鈉V-P半固體和3%氯鈉ONPG。本成套生化鑒定管不含3%氯鈉三糖鐵瓊脂。請參照標準操作程序判斷結(jié)果。直接接種:用接種針從平板上挑取已純化培養(yǎng)的同一落接種于需要試驗的生化管中。懸液法:取一內(nèi)盛2ml無水或無鹽水試管,用接種針從純化培養(yǎng)的平板上挑取單個落至無水中仔細研磨制成0.5麥氏濁度的均一細懸液,滴入需要試驗的試管中,每管3滴。其中固體和半固體生化管采用穿剌接種。接種完后放37℃培養(yǎng)。

變形桿成套生化鑒定管(SN) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:13種/盒*10 產(chǎn)品用途:變形桿成套生化鑒定管(SN)變形桿成套生化鑒定管(SN)組成:苯丙氨酸脫羧酶1支、尿素酶1支、明膠生化管1支、西蒙氏枸櫞酸鹽1支、鳥氨酸脫羧酶肉湯1支、色氨酸肉湯1支、氨基酸脫羧酶對照1支、木糖1支、麥芽糖 1支、肌醇1支、甘露醇1支、核糖醇1支、1支、無液體石蠟1支。

大腸桿成套(新國標) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:4種*4套 產(chǎn)品用途:用于大腸桿成套生化鑒定用于大腸桿鑒定

SIM生化管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支/盒 產(chǎn)品用途:用于單增李斯特氏的生化用途:用于單增李斯特氏的生化。

0.4mg無硫代硫酸鈉水溶液 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:0.4mg/支*20 產(chǎn)品用途:添加在水樣采集袋里使用添加在水樣采集袋里使用致瀉大腸埃希氏生化套裝

致瀉大腸埃希氏生化套裝 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:8種*2套/盒 產(chǎn)品用途:用于致瀉大腸埃希氏生化鑒定。用于致瀉大腸埃希氏生化鑒定。

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