服務：所有的檢測試劑盒均免費代測，您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術(shù)指導，免費代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務！

產(chǎn)品名稱：冷誘導RNA結(jié)合蛋白試劑盒

貨號：FS-016286

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；

2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準

Goat Anti-Mouse IgG/Alexa Fluor 555Alexa Fluor 555標記的羊抗小鼠IgG 0.1ml

Mouse Anti-human IgG(3D3)/Bio生物素標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/FITCFITC標記的兔抗小鼠IgG 0.3ml

Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 488Alexa Fluor 488標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

Goat Anti-human IgM/PEPE標記的羊抗人IgM 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy3PE-Cy3標記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Cy5Cy5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/Gold膠體金標記的兔抗牛IgM 2ml

Rabbit Anti-Goat IgG/Cy5.5Cy5.5標記的兔抗羊IgG 0.1ml

Rabbit Anti-horse IgG/RBITC羅丹明標記的兔抗馬IgG 0.3ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/Bio生物素標記的兔抗猴IgG 0.1ml

Rabbit anti-mouse Kappa light chain/APCAPC標記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

冷誘導RNA結(jié)合蛋白試劑盒通用試劑  亞磷酸二異丙酯  Diisopropyl phosphite,98%  1809-20-7  25G

通用試劑  2-氧代-4-苯基丁酸...  Ethyl 2-oxo-4-phenylbutyrate,97%  64920-29-2  5ML

通用試劑  2,3-丁二酮  2,3-Butanedione,97%  431-03-8  100ML

通用試劑  β-苯甲酰丙烯酸乙脂  Ethyl 3-benzoylacrylate technical grad...  17450-56-5  10ML

通用試劑  甲基異丁基甲酮  4-Methyl-2-pentanone,≥99%  108-10-1  100ML

通用試劑  2-苯基乙基硫代異氰...  2-Phenylethyl isothiocyanate,99%  130638  5G

通用試劑  二甲氧基乙酸甲酯  Methyl dimethoxyacetate,97%  89-91-8  5G

通用試劑  1,3-二甲基-5-吡唑酮  1,3-Dimethyl-5-pyrazolone,97%  2749-59-9  25G

通用試劑  環(huán)己酮  Cyclohexanone,≥99.5%  108-94-1  100ML

通用試劑  二乙氧基乙酸乙酯  Ethyl diethoxyacetate,97%  6065-82-3  25G

通用試劑  3, 3-二甲氧基丙酸...  Methyl 3,3-dimethoxypropionate,97%  7424-91-1  5G

通用試劑  3-硝基水楊酸甲酯  Methyl 3-nitrosalicylate,98%  22621-41-6  1G

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 

（2）酶標板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。