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產(chǎn)品名稱：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4試劑盒

貨號：FS-016338

規(guī)格：96T/48T 

保存；2-8℃。

檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.

檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。

實驗流程:

1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；

3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；

4. 洗板3次；

5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；

6. 洗板5次；

7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；

8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

試劑和樣本的控制方法：

一、試劑

1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān)，我司嚴(yán)格按照國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，已獲得國家承認(rèn)的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必?fù)?dān)心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。

2.試劑的準(zhǔn)備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進(jìn)行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。

二、樣本

1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風(fēng)濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；

類風(fēng)濕因子的控制方法：

①用F(ab)2替代完整的IgG；

②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；

③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解。

檢測程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

6.  洗板：同前。

7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。

8.  每孔加入100ul 終止液混勻。

9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測 吸光值。

注意事項:

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4．  如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。

5．  封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)

CCP 英文名稱：瓜氨酸環(huán)肽抗體 規(guī)格： 0.1ml

CCDC104 英文名稱：卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白104抗體 規(guī)格： 0.2ml

C12ORF24 英文名稱：12號染色體開放閱讀框24抗體 規(guī)格： 0.2ml

phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 英文名稱：磷酸化原癌基因c-Jun抗體 規(guī)格： 0.1ml

Phospho-Beta Catenin (Ser45) 英文名稱：磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格： 0.1ml

C1orf162  英文名稱：1號染色體開放閱讀框162抗體 規(guī)格： 0.2ml

CEP27 英文名稱：中心體蛋白27抗體 規(guī)格： 0.1ml

phospho-CDKN1B (Thr157) 英文名稱：磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 規(guī)格： 0.1ml

CASC3 英文名稱：腫瘤易感候選基因3抗體 規(guī)格： 0.1ml

CSFV Envelope glycoprotein E2 英文名稱：豬瘟病毒包膜糖蛋白E2抗體 規(guī)格： 0.1ml

C4orf27 英文名稱：4號染色體開放閱讀框27抗體 規(guī)格： 0.2ml

CD24 英文名稱：CD24抗體 規(guī)格： 0.1ml

尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4試劑盒通用試劑  2,6-二異丙基苯胺  2,6-Diisopropylaniline,97%  24544-04-5  5G

通用試劑  二異丙醇胺  Diisopropanolamine,≥98.0%  110-97-4  100G

標(biāo)準(zhǔn)品  甘草素;甘草醇  Liquiritigenin (≥98%,HPLC)  578-86-9  20MG

通用試劑  2,2'-二吡啶胺  2,2'-Dipyridylamine,99%  1202-34-2  1G

通用試劑  1-萘甲胺  1-Naphthylmethylamine,97%  118-31-0  1G

通用試劑  二環(huán)己胺(DCHA)  Dicyclohexylamine,99%  101-83-7  100G

通用試劑  (R)-(+)-1-(2-萘基)...  (R)-(+)-1-(2-Naphthyl)ethylamine,≥99.0%  3906-16-9  500MG

標(biāo)準(zhǔn)品  大黃酸  Rhein (≥98%,HPLC)  478-43-3  20MG

通用試劑  3-甲氧基芐胺  3-Methoxybenzylamine,98%  5071-96-5  1G

類別(Key)  中文名(CN)  英文名(EN)  CAS No.  規(guī)格(SP)

標(biāo)準(zhǔn)品  大黃素  Emodin (≥98%,HPLC)  518-82-1  20MG

通用試劑  2-甲氧基芐胺  2-Methoxybenzylamine,98%  6850-57-3  5G

操作流程：

（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 

（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。

（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。

（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 

（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（6）洗板，同（4）。 

（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 

（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 

（9）洗板，同（4）。 

（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 

（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 

（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。