
綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以?xún)?nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
產(chǎn)品名稱(chēng):粗糙脈孢菌
拉丁文: Neurospora crassa
提供形式: 凍干物
**等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)纖維素酶、半纖維素酶,可發(fā)酵己糖、戊糖產(chǎn)生乙醇
使用范圍:
(1)合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚,組成成分,重復(fù)性強(qiáng),而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏(Czapek)培養(yǎng)基等。
(2)天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成,如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯,前者用于培養(yǎng)霉菌,后者用于培養(yǎng)**。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定,也難以確定,但配制方便,營(yíng)養(yǎng)豐富,培養(yǎng)效果好,所以常被采用。
(3)半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi),或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分,如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。
培養(yǎng)及打管說(shuō)明:
1、安瓿瓶開(kāi)封:用浸過(guò)75%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管,用火焰加熱其頂端,滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂,用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。
2、菌株恢復(fù)培養(yǎng):用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基,滴入安瓿管內(nèi),輕輕振蕩,使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液,移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中,并在建議的條件下培養(yǎng)。
3、注意事項(xiàng):菌種活化前,請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下,某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,延遲期較長(zhǎng),需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)
4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。
5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
保藏方法:
1. 傳代培養(yǎng)保藏法
又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等(后者作保藏厭氧**用),培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。
2. 液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養(yǎng)的變相方法,能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間,它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟,一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡,另一方面可阻止氧氣進(jìn)入,以減弱代謝作用。
3. 載體保藏法
是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。
4. 寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代,此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。
5. 冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速凍結(jié)(約-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6. 冷凍干燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分(真空干燥)。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液,以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類(lèi)、甘油、二甲亞砜等。
派立辛 CAS 62499-28-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
秋水仙苷 CAS 602-41-5 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
焦袂康酸 CAS 496-63-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
L-谷胱甘肽 CAS 70-18-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
冬凌草乙素 CAS 52617-37-5 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
橙黃Ⅰ CAS 523-44-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
大戟因子L1 CAS 76376-43-7 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
CAS 規(guī)格: ; 訂購(gòu)|咨詢(xún)
芫花素 CAS 437-64-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
桃葉珊瑚苷 CAS 479-98-1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
桔皮素 CAS 481-53-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
三油酸甘油酯 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;0.15ml 訂購(gòu)|咨詢(xún)
粗糙脈孢菌大鼠凋亡相關(guān)因子配體(FASL) C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞
猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP) C-33 A(**頸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人白細(xì)胞分化抗原30(CD30) C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人抗**通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab) C4-2(前列腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人胸腺白血病抗原(TLa) C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠α1微球蛋白(α1-MG) C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞
小鼠氧化型高密度脂蛋白(ox-HDL)ELISA試劑盒 C918(眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠胱天蛋白酶8(Casp-8) Ca Ski(宮頸癌上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雞傳染性鼻炎抗體(IC) Ca Ski, 宮頸癌細(xì)胞
人可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L) Caco-2(結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP) CA46(Burkitts**瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2