保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

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產(chǎn)品名稱：金龜子綠僵菌小孢變種

拉丁文： Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae

**等級： 1

模式菌株： no

應(yīng)用領(lǐng)域： 生物防治

使用范圍：

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚，組成成分，重復性強，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎(chǔ)上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。 

微生物培養(yǎng)方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。

7-氯-4-羥-2-甲喹啉分子式：193.63英文名稱：7- -4- hydroxy -2- methyl groupCAS號：15644-88-9分子量： C10H8ClNO

2--4-嘧分子式：英文名稱：2- amino -4- phenylCAS號：2305-87-5分子量： C10H9N3

1-(3′-磺酸)-3-甲-5-吡唑分子式：253英文名稱：1- (3 '- sulfonic acid) phenyl -3- methyl -5- aminopyrazoleCAS號：分子量： C10H11N3O3S

3,3'-二硝二砜分子式：308.27英文名稱：3,3'- two nitro two benzeneCAS號：1228-53-1分子量： C12H8N2O6S

5,6-二溴-2,1,3-并噻二唑分子式：293.96英文名稱：5,6- dibromo -2,1,3- dibenzothiophene was twoCAS號：18392-81-9分子量： C6H2Br2N2S

3,4-二吡分子式：109.13英文名稱：3,4- twoCAS號：54-96-6分子量： C5H7N3

丙氟替卡松英文名稱：Fluticasone propionate分子式：556.63分子量： C28H35F3O6SCAS號：80474-14-2

氟米松英文名稱：Flumethasone分子式：410.45分子量： C22H28F2O5CAS號：2135-17-3

根皮素英文名稱：Root bark分子式：274.27分子量：C15H14O5CAS號：60-82-2

亮橙H英文名稱：Bright orange H分子式：378.38分子量： C18H15N2NaO4SCAS號：52749-23-2

6-硝并噻唑分子式：506.52884英文名稱：6- nitrobenzene and thiazoleCAS號：380740分子量： C22H26N4O8S

金龜子綠僵菌小孢變種豬(HYD)  小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞完全培養(yǎng)基100mL

大鼠生長(GH)  小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞英文名稱：DCS

人B-細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)  小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞英文名稱：DCS

人堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)  小鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞完全培養(yǎng)基100mL

人維生素A(VA)  小鼠胎兒真皮成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL

小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)  小鼠外周血白細胞完全培養(yǎng)基100mL

小鼠胰淀素(Amylin)  小鼠胃癌細胞英文名稱：MFC

大鼠環(huán)氧合酶2（COX-2）ELISA試劑盒  小鼠胃癌細胞英文名稱：MFC

貓p27核心抗原(P27)  小鼠胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL

人破傷風抗體(Tetanus Ab)  小鼠小腸血管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)  小鼠小腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL