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產品名稱：雪白根霉

拉丁文： RhizopusniveusYamaz

**等級： 1

模式菌株： no

應用領域： 產糖化酶

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內，再放入低溫冰箱內進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內，再置于冰箱內進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍廣的微生物保存法。

B-甲吡分子式：英文名稱：B- methyl pyridineCAS號：分子量：

5-乙酰-2-甲吡分子式：135.16316英文名稱：5- acetyl -2-CAS號：36357-38-7分子量： C8H9NO

棗仁皂苷A英文名稱：Jujuboside A分子式：1207.35136分子量：C58H94O26CAS號：55466-04-1

4-溴三氟硼酸鉀分子式：262.9英文名稱：4- Bromophenyl three kbf4CAS號：374564-35-9分子量： C6H4BBrF3K

全氟辛磺酸鉀分子式：538.22英文名稱：Perfluorooctanesulfonic acid potassiumCAS號：2795-39-3分子量： C8F17KO3S

3,5-二甲-1,2,4-三唑分子式：97.12英文名稱：3,5- two -1,2,4- threeCAS號：7343-34-2分子量： C4H7N3

4-三氟甲氧氟分子式：180.1英文名稱：4- three fluorine methoxy fluorobenzeneCAS號：352-67-0分子量： C7H4F4O

巖白菜素英文名稱：Bergeninum分子式：328.27144分子量：C14H16O9CAS號：477-90-7

蒽醌英文名稱：Anthraquinone分子式：208.22分子量： C14H8O2CAS號：84-65-1

2-萘酚-6,8-二磺酸二鉀分子式：380.48英文名稱：Two -6,8- two 2- naphthol sulfonic acid potassiumCAS號：842-18-2分子量： C10H6K2O7S2

性藍EA英文名稱：Acid blue EA分子式：792.85分子量： C37H34N2Na2O9S3CAS號：2650-18-2

雪白根霉豬熱休克蛋白70(HSP-70)  5-8F, 高轉移鼻咽癌細胞系

大鼠生長因子(GH)  HCT116, 結直腸癌細胞

人B細胞瘤因子2(Bcl-2)  LncaP, 前列腺癌細胞

人降鈣素基因相關肽(CGRP)  6-10B, 鼻咽癌細胞系

人維生素D(VD)  lovo, 結腸癌細胞

小鼠B因子(BF)  DU 145, 前列腺癌細胞

小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)  Hep-2, 喉癌細胞系

大鼠活化蛋白C(APC)  MDA-MB-231, 乳腺癌細胞

綿/山羊胰島素(INS)  HL-60, 早幼粒白血病細胞

人葡萄糖激酶調節(jié)蛋白(GKRP)  MG-63, 骨肉瘤細胞

人多效生長因子(PTN)  CaEs-17, 食管癌細胞株

使用范圍：

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學物質。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚，組成成分，重復性強，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)。這類培養(yǎng)基的化學成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質的需要。 

微生物培養(yǎng)方法：

1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞，經培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。

2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。

上述兩種方法雖然都可以實現觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計數，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復雜，對平板的要求比較高，可參照以下步驟：

a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。

b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。

c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展，使之分布均勻。