綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

（1）前期準(zhǔn)備：（A）處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；

（2）按比例配制培養(yǎng)材料；

（3）導(dǎo)入曝氣，進(jìn)行繁殖培養(yǎng)；

（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；

（5）分離并檢測(cè)；

（6）取液儲(chǔ)存；通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng)，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。

產(chǎn)品名稱(chēng)：魯氏毛霉

拉丁文： Mucor rouxianus

提供形式： 凍干物

**等級(jí)： 1

模式菌株： no

應(yīng)用領(lǐng)域： 糖化

使用范圍：

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，組成成分，重復(fù)性強(qiáng)，而且微生物在這類(lèi)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較慢。如高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)**。這類(lèi)培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營(yíng)養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機(jī)物的基礎(chǔ)上適當(dāng)加入已知成分的無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類(lèi)培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的需要。 

培養(yǎng)及打管說(shuō)明：

1、安瓿瓶開(kāi)封：用浸過(guò)75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無(wú)菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無(wú)菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項(xiàng)：菌種活化前，請(qǐng)將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后，延遲期較長(zhǎng)，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長(zhǎng)

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開(kāi)的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長(zhǎng)保藏時(shí)間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動(dòng)物、昆蟲(chóng)、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當(dāng)于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進(jìn)行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護(hù)劑來(lái)制備細(xì)胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對(duì)細(xì)胞的損害。保護(hù)性溶質(zhì)可通過(guò)氫和離子鍵對(duì)水和細(xì)胞所產(chǎn)生的親和力來(lái)穩(wěn)定細(xì)胞成分的構(gòu)型。保護(hù)劑有牛乳、血清、糖類(lèi)、甘油、二甲亞砜等。

1-丙酮氯吡分子式：171.62英文名稱(chēng)：1- acetone base pyridineCAS號(hào)：42508-60-1分子量： C8H10ClNO

3-甲-4-氯聯(lián)分子式：英文名稱(chēng)：3- methyl -4- chlorideCAS號(hào)：分子量：

六鈷酸鉀分子式：332.33英文名稱(chēng)：Six cyanocobalamin potassiumCAS號(hào)：13963-58-1分子量： C6CoK3N6

1.3－氯丙－2英文名稱(chēng)：1.3 - - - - - - - - - 2分子式：分子量：CAS號(hào)：

4-(3-)-分子式：186.25英文名稱(chēng)：4- (3- - phenyl) - piperidineCAS號(hào)：370864-72-5分子量： C12H14N2

2--5-氯-3-硝吡分子式：173.56英文名稱(chēng)：2- amino -5- -3-CAS號(hào)：5409-39-2分子量： C5H4ClN3O2

羅漢果皂苷IV英文名稱(chēng)：Mogroside IV分子式：1125.29分子量：C54H92O24CAS號(hào)：89590-95-4

2,6-二氯喹喔啉分子式：199.04英文名稱(chēng)：2,6- two dichloro quinoxalineCAS號(hào)：18671-97-1分子量： C8H4Cl2N2

洛硝噠唑分子式：200.15英文名稱(chēng)：The nitrateCAS號(hào)：7681-76-7分子量： C6H8N4O4

2-溴-4-硝甲分子式：216.03英文名稱(chēng)：2- -4- nitro tolueneCAS號(hào)：7745-93-9分子量： C7H6BrNO2

間碘三氟甲氧分子式：288.01英文名稱(chēng)：Iodine three fluorine methyl groupCAS號(hào)：198206-33-6分子量： C7H4F3IO

魯氏毛霉人可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)  

人血栓素B2(TXB2)  

小鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)  

小鼠瘤特異生長(zhǎng)因子/瘤相關(guān)因子(TSGF)  

大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)  

雞組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ  

人單胺氧化酶(MAO)  

人磷酸葡萄糖變位酶(PGM)  

人乙酰膽堿(ACH)  

魚(yú)脫碘酶3（DIO3）ELISA檢測(cè)試劑盒96T/48TELISA  

小鼠凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)