綜合微生物的培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

（1）前期準備：（A）處理；（B）制備Biolite水；（C）檢查設(shè)備和材料；

（2）按比例配制培養(yǎng)材料；

（3）導(dǎo)入曝氣，進行繁殖培養(yǎng)；

（4）取液觀察；（a）取液；（b）稀釋菌液；（c）平板培養(yǎng)；

（5）分離并檢測；

（6）取液儲存；通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強，培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi)，菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變，且繁殖快速。

產(chǎn)品名稱：灰樹花

拉丁文： Grifola frondosa

提供形式： 斜面培養(yǎng)物

**等級： 1

模式菌株： no

使用范圍：

（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分完全是已知的各種化學(xué)物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學(xué)成分清楚，組成成分，重復(fù)性強，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。 

（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯和普通牛肉湯，前者用于培養(yǎng)霉菌，后者用于培養(yǎng)**。這類培養(yǎng)基的化學(xué)成分很不恒定，也難以確定，但配制方便，營養(yǎng)豐富，培養(yǎng)效果好，所以常被采用。 

（3）半合成培養(yǎng)基。在天然有機物的基礎(chǔ)上適當加入已知成分的無機鹽類，或在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加某些天然成分，如培養(yǎng)霉菌用的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。這類培養(yǎng)基能更有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。 

培養(yǎng)及打管說明：

1、安瓿瓶開封：用浸過75％酒精的脫脂棉擦凈安瓿管，用火焰加熱其頂端，滴少量無菌水至加熱頂端使之破裂，用銼刀或者鑷子敲下已破裂的安瓿管頂端。

2、菌株恢復(fù)培養(yǎng)：用無菌吸管吸取0.3--0.5ml適宜的液體培養(yǎng)基，滴入安瓿管內(nèi)，輕輕振蕩，使凍干菌體溶解呈懸浮狀。吸取全部菌體懸浮液，移植于1-2支建議的培養(yǎng)基試管中，并在建議的條件下培養(yǎng)。

3、注意事項：菌種活化前，請將安瓿管保存在6-10℃的環(huán)境下，某些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后，延遲期較長，需要連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長

4、復(fù)蘇后的菌種在傳1-2代后使用。

5、暫不啟開的安瓿及復(fù)蘇后需保藏的斜面應(yīng)于4℃中保藏。
圖3

保藏方法：

1. 傳代培養(yǎng)保藏法

又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧**用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。

2. 液體石蠟覆蓋保藏法

是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進入，以減弱代謝作用。

3. 載體保藏法

是將微生物吸附在適當?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當廣泛。

4. 寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培養(yǎng)基上生長的微生物，如病毒、立克次氏體、螺旋體等，它們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內(nèi)感染并傳代，此法相當于一般微生物的傳代培養(yǎng)保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍干燥保藏法進行保藏。

5. 冷凍保藏法

可分低溫冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速凍結(jié)（約-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6. 冷凍干燥保藏法

先使微生物在極低溫度（-70℃左右）下快速冷凍，然后在減壓下利用升華現(xiàn)象除去水分（真空干燥）。有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍干燥保藏法等均需使用保護劑來制備細胞懸液，以防止因冷凍或水分不斷升華對細胞的損害。保護性溶質(zhì)可通過氫和離子鍵對水和細胞所產(chǎn)生的親和力來穩(wěn)定細胞成分的構(gòu)型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞砜等。

4--3-溴-5-硝三氟甲分子式：285.02英文名稱：4- amino -3- -5- nitro three fCAS號：113170-71-1分子量： C7H4BrF3N2O2

肉豆蔻酸鉀分子式：266.46英文名稱：Myristic acid potassiumCAS號：13429-27-1分子量： C14H27KO2

曙紅Y(水溶)英文名稱：Eosin Y (Shui Rong)分子式：691.85分子量： C20H6Br4Na2O5CAS號：17372-87-1

蘇丹Ⅳ英文名稱：Su Dan分子式：380.44分子量： C24H20N4OCAS號：85-83-6

1-(2-脫氧-2-氟-beta-D-阿拉伯呋喃)尿嘧分子式：246.19英文名稱：1- (2- -2- -beta-D- Arabia difuran deoxy fluorine uracil)CAS號：69123-94-0分子量： C9H11FN2O5

茵陳色原酮英文名稱：Capillarisin分子式：316.26分子量：C16H12O7CAS號：56365-38-9

3-氟-2羥吡分子式：113.09英文名稱：3- -2 hydroxy pyridineCAS號：1547-29-1分子量： C5H4FNO

2-溴-4-吡分子式：173.01英文名稱：2- -4- amino pyridineCAS號：7598-35-8分子量： C5H5BrN2

3-甲啉分子式：101.15英文名稱：3- methyl morpholineCAS號：42185-06-8分子量： C5H11NO

4-(4-溴)啉分子式：242.11英文名稱：4- (4-) Ma LanCAS號：30483-75-1分子量： C10H12BrNO

3-溴-5-碘吡分子式：283.89英文名稱：3- bromide -5-CAS號：233770-01-9分子量： C5H3BrIN

灰樹花人非小細胞肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒英文名稱：Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen,LTA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA Kit，48T/96T 進口/國產(chǎn)

人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒英文名稱：Human Interleukin 1β，IL-1β ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T人血管**素2(ANG-2)ELISA Kit，48T/96T 特價促銷

大鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒英文名稱：Rat nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA Kit，48T/96T

小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,sPECAM-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人抗中性粒細胞顆?？贵w(ANGA)ELISA Kit，48T/96T

人皮膚細胞相關(guān)抗原(CLA)ELISA試劑盒英文名稱：Human cutaneous lymphocyte-associated antigen,CLA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA Kit，48T/96T 進口/原裝

人抗補體1q抗體(C1q)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Anti-Complement 1q antibody,C1q ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)進口/國產(chǎn)

人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA試劑盒英文名稱：Human Collagen Type Ⅲ，Col Ⅲ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit，48T/96T 特價促銷

大鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒英文名稱：Rat Activin A,ACV-A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA Kit，48T/96T

小鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor,VEGFR-3/Flt-4 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA Kit，48T/96T

人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA試劑盒英文名稱：Human T-cell specific GTPase,Tgtp ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA Kit，48T/96T 進口/原裝

人α-輔肌動蛋白3(ACTN-3)ELISA試劑盒英文名稱：Human α-Actinin 3，ACTN-3 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA Kit，48T/96T進口/國產(chǎn)