
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞
產(chǎn)品英文:RAW 264.7
貨號(hào):BH-X019689
細(xì)胞培養(yǎng)條件:DMEM+10%FBS+1%P/S 不能用胰酶消化細(xì)胞刮代替,易分化傳代時(shí)密度要大
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細(xì)胞STR鑒定:不提供STR鑒定報(bào)告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運(yùn)輸溫度(℃):常溫
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。
產(chǎn)品名稱(chēng) |
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 |
規(guī)格 |
1×106 |
貨號(hào) |
FS-X019689 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
細(xì)胞處理方法:
以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說(shuō)明書(shū)僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)電話(huà)或郵件聯(lián)系。
一.貼壁細(xì)胞
客戶(hù)接收到細(xì)胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無(wú)菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
二.懸浮細(xì)胞
1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精(建議配制75%酒精的水是過(guò)的)培養(yǎng)瓶外部。
2. 肉眼觀(guān)察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴(yán)格無(wú)菌操作,打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2 培養(yǎng)。
腸道病毒71型/手足口病病毒抗體 Anti-EV71 0.1ml
植物延展素-βAnti-EXPB-2death inducer-obliterator-2 0.2ml
脂肪酸結(jié)合蛋白2抗體 Anti-Fabp2 0.1ml
腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 Anti-FABP 0.1ml
第八因子相關(guān)抗原抗體 Anti-factor VIII 0.1ml
Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白Anti-FADD 0.1ml
胰腺衍生因子抗體 Anti-FAM3B/PANDER 0.1m
小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1(HABP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforHyaluronanBindingProtein1(HABP1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforFibrinogenDegradationProduct(FDP) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
博來(lái)霉素水解酶(BLMH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforBleomycinHydrolase(BLMH) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
Vezatin蛋白(VEZT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforVezatin(VEZT) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
TBP結(jié)合轉(zhuǎn)錄向下調(diào)節(jié)因子1(DR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforDownRegulatorOfTranscription1,TBPBinding(DR1) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
休眠蛋白(RSN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforRestin(RSN) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforN-TerminalProAtrialNatriureticPeptide(NT-ProANP) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
松弛肽(RLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforRelaxin(RLN) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforProgrammedCellDeathProtein6InteractingProtein(PDCD6IP) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
吻素受體(KISS1R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法) ELISAKitforKisspeptinReceptor(KISS1R) 規(guī)格:48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)