
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
豬肺泡巨噬細胞 |
1×106 |
FS-X019740 |
產(chǎn)品名稱:豬肺泡巨噬細胞
產(chǎn)品英文:3D4/21
貨號:BH-X019740
細胞培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%丙酮酸鈉+1%NEAA+1%Hepes+1%L-谷氨酰胺+2.2g/L葡萄糖+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管的進展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。
(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
骨橋蛋白抗體 Anti-OPN 0.1ml
增食欲素-A/欲AAnti-ORX-A 0.2ml
成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 Anti-Osx 0.1ml
抗水稻白葉枯病Os05g0477200蛋白抗體 anti-Os05g/0477200 protein 1ml
縮宮素受體抗體 anti-OTR 0.2ml
雞卵白蛋白/卵清蛋白抗體 Anti-OVA 0.1ml
食欲素受體抗體 Anti-OXR 1ml
豬肺泡巨噬細胞β血小板球蛋白(β-TG)elisa檢測試劑盒英文名稱:β-TG ELISA Kit,英文縮寫:β-TG,產(chǎn)品別名:β血小板球蛋白(β-TG)ELISA檢測試劑盒,β血小板球蛋白(β-TG)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
α1防御素(DEFA1)elisa檢測試劑盒英文名稱:DEFA1 ELISA Kit,英文縮寫:DEFA1,產(chǎn)品別名:α1防御素(DEFA1)ELISA檢測試劑盒,α1防御素(DEFA1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
β2微球蛋白(β2-MG)elisa檢測試劑盒英文名稱:β2-MG ELISA Kit,英文縮寫:β2-MG,產(chǎn)品別名:β2微球蛋白(β2-MG)ELISA檢測試劑盒,β2微球蛋白(β2-MG)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Salusin Alpha(Salusin α)elisa檢測試劑盒英文名稱:Salusin α ELISA Kit,英文縮寫:Salusin α,產(chǎn)品別名:Salusin Alpha(Salusin α)ELISA檢測試劑盒,Salusin Alpha(Salusin α)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)elisa檢測試劑盒英文名稱:Nogo-A Ab ELISA Kit,英文縮寫:Nogo-A Ab,產(chǎn)品別名:NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)ELISA檢測試劑盒,NOGO-A抗體(Nogo-A Ab)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)elisa檢測試劑盒英文名稱:EJ/GlyRS ELISA Kit,英文縮寫:EJ/GlyRS,產(chǎn)品別名:EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA檢測試劑盒,EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成酶抗體(EJ/GlyRS)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
CD209分子(CD209)elisa檢測試劑盒英文名稱:CD209 ELISA Kit,英文縮寫:CD209,產(chǎn)品別名:CD209分子(CD209)ELISA檢測試劑盒,CD209分子(CD209)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Apelin12(AP12)elisa檢測試劑盒英文名稱:AP12 ELISA Kit,英文縮寫:AP12,產(chǎn)品別名:Apelin12(AP12)ELISA檢測試劑盒,Apelin12(AP12)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)elisa檢測試劑盒英文名稱:Col Ⅰ ELISA Kit,英文縮寫:Col Ⅰ,產(chǎn)品別名:Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA檢測試劑盒,Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)elisa檢測試劑盒英文名稱:16-α OHE-1 ELISA Kit,英文縮寫:16-α OHE-1,產(chǎn)品別名:16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA檢測試劑盒,16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
瘦素(LEP/Leptin)elisa檢測試劑盒英文名稱:LEP/Leptin ELISA Kit,英文縮寫:LEP/Leptin,產(chǎn)品別名:瘦素(LEP/Leptin)ELISA檢測試劑盒,瘦素(LEP/Leptin)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。