細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	293FT人胚腎細(xì)胞	英文名稱(chēng)	293FT
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X631	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	腎	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞名稱(chēng)；293FT人胚腎細(xì)胞

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；腎

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介；293FT細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)SV40大T抗原，并且促進(jìn)適病毒產(chǎn)物的產(chǎn)生。

STR位點(diǎn)信息；Amelogenin：X；CSF1PO：7，12；D13S317：12；D16S539：9，13；D18S51：17，18；D19S433：15，18；D21S11：30.2；D2S1338：19；D3S1358：15，17；D5S818：8，9；D7S820：11；D8S1179：12，14；FGA：23；TH01：7，9.3；TPOX：11；vWA：16，19；

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

使用權(quán)限；A類(lèi)

細(xì)胞規(guī)格；1×106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測(cè)；無(wú)

保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; PTA-5077 ；中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心

培養(yǎng)基；90% DMEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

干擾素-gamma受體1抗體 IFNGR1

嗜乳脂蛋白樣8抗體 BTNL8

小鼠激活T-細(xì)胞核因子1(NFATC1)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)elisa檢測(cè)試劑盒

Helly 固著液 人白介素8(IL-8/CXCL8)自身抗體elisa檢測(cè)試劑盒

蛋白酶抑制劑14抗體 PI14

熱休克蛋白104抗體 Hsp104

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體  Anti-TREML2/TLT2 NADPH氧化酶活化蛋白p47抗體  Anti-p47-phox

腸道71型/手足口病抗體  Anti-EV71 polyprotein VP1 源轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白Sin3A抗體  Anti-mSin3A

Cy3標(biāo)記的羊抗小鼠IgM Goat Anti-Mouse IgM / Cy3

成蛋白相關(guān)蛋白1抗體 FMNL1

犬催乳素(PRL/LTH)elisa分析檢測(cè)試劑盒 PRL/LTH ELISA Kit

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)elisa分析檢測(cè)試劑盒 TIMP-3ELISAkit

大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)elisa分析檢測(cè)試劑盒 12-HETE ELISA Kit

293FT人胚腎細(xì)胞人封閉蛋白4(CLDN4)elisa分析檢測(cè)試劑盒 HumanCLDN4ELISAKit

PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK5A蛋白抗體 PDZD5A

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白135抗體 CCDC135

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。