細胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	95-D [PLA-801D]（人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞）	英文名稱	95-D PLA-801D
產(chǎn)品貨號	AXB9801	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細胞形態(tài)	上皮細胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	肺	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞別稱；PLA801D; PLA801-95D; 95D; 95-D; 801-D；高轉(zhuǎn)移肺癌細胞

種屬來源；人

組織來源；肺

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；上皮細胞樣

背景簡介；95-D細胞是一株高轉(zhuǎn)移肺癌細胞。

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

培養(yǎng)基；RPMI-1640+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

磷酸二酯酶6α抗體    PDE6A

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體    CCDC120

破傷風(fēng)輕鏈抗體  Anti-Tetanus toxin light chain    硫氧還蛋白過氧化物酶Ⅱ/巰基抗氧化蛋白抗體  Anti-Peroxiredoxin 2

PCID1蛋白抗體  Anti-PCID1    類固醇5α還原酶2抗體  Anti-SRD5A2

Cy5標記的兔抗馬IgG H&L    Rabbit Anti-Horse IgG H&L / Cy5

EID2蛋白抗體   EID2

AN1型鋅指蛋白5抗體  Anti-ZFAND5    NADH脫氫酶α家族8抗體  Anti-NDUFA8

細胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體  Anti-RAD9    分選連接蛋白10抗體  Anti-SNX10

大鼠5羥二十碳四烯酸(5-HETE)elisa分析檢測試劑盒    5-HETE ELISA Kit

人干擾素誘導(dǎo)T細胞趨化因子(ITAC/CXCL11)elisa分析檢測試劑盒    HumanITACELISAKit

二氫黃酮醇還原酶（DFR）測試盒    細胞CASPASE-1蛋白表達熒光定量檢測試劑盒

小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)elisa檢測試劑盒    果糖-1,6-二磷酸醛縮酶（FDA）測試盒

MCTP2蛋白抗體    MCTP2

95-D [PLA-801D]（人高轉(zhuǎn)移肺癌細胞）1號染色體開放閱讀框100抗體    C1orf100

JNK/ SAPK抑制激酶抗體    JIK/TAOK3

羧肽酶CPO抗體    Carboxypeptidase O

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。