細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞	英文名稱	AR42J:AR42J
產(chǎn)品貨號	A01X1120	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	大鼠	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	胰腺外分泌細(xì)胞腫瘤	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細(xì)胞別稱：AR4-2J; AR-42J；大鼠胰腺外分泌細(xì)胞

種屬來源：大鼠

年齡性別：

組織來源：胰腺外分泌細(xì)胞腫瘤

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：AR42J細(xì)胞在腎上腺皮質(zhì)刺激下可誘導(dǎo)出外分泌活性，并伴有廣泛的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)重構(gòu)。

生物等級：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：amylase and other exocrine enzymes

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-1492 BCRC; 60160 ECACC; 93100618

培養(yǎng)基：F12K+20% FBS+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

味覺2型受體蛋白家族49抗體 TAS2R49    細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 BIN3

src原癌基因單克隆抗體 SRC    TRIM43B蛋白抗體 TRIM43B

AF680標(biāo)記的上皮細(xì)胞粘附分子（CD326）抗體 EpCAM, Alexa Fluor 680 conjugated    AF750標(biāo)記的造血干細(xì)胞抗原CD133抗體 CD133, Alexa Fluor 750 conjugated

緊密連接蛋白2單克隆抗體 Claudin 2    卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白126抗體 CCDC126

原鈣粘蛋白γA1抗體 PCDHGA1    粘蛋白20抗體 MUC20

分泌型磷脂酶A2亞基5抗體 Secretory phospholipase A2 Type V   富含脯氨酸蛋白18抗體 PRR18

G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體 G gamma4    HRP標(biāo)記的人CD34單克隆抗體 CD34, HRP conjugated

凝血酶原酶/維介素抗體 FGL2    羥乙基淀粉抗體 Hydroxyethyk starch

大鼠促黃體 （LH）elisa檢測試劑盒    小鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)elisa分析檢測試劑盒

綿羊甲狀腺素(T4)elisa分析檢測試劑盒    植物過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量檢測試劑盒

植物維生素B6(VB6)elisa檢測試劑盒    大鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物 PAP elisa檢測試劑盒

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶CYP2C（AMD）活性    小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)elisa檢測試劑盒

人蛋白酶3(PR3)elisa分析檢測試劑盒    細(xì)胞磷酸甲羥戊酸激酶（phosphomevalonate kinase）活性

AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞小鼠維生素B9(VB9)elisa檢測試劑盒    大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa檢測試劑盒

魚褪黑素(MT)elisa分析檢測試劑盒    MT ELISA Kit

人成纖維細(xì)胞生長因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)elisa分析檢測試劑盒    HumanFGF21ELISAkit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。