細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	BEWO人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞	英文名稱	BEWO:BEWO
產(chǎn)品貨號	A01X665	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	胎盤	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細(xì)胞別稱：人胎盤絨膜癌細(xì)胞；BeWo

種屬來源：人

年齡性別：胚胎

組織來源：胎盤

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：BeWo細(xì)胞取自人絨癌腦轉(zhuǎn)移組織，在倉鼠頰囊移植傳代8年。利用移植瘤組織進(jìn)行體外培養(yǎng)，建立細(xì)胞系。利用不同傳代方法建立了不同亞系，JEG-3是其衍生克隆。Bewo細(xì)胞可以產(chǎn)生雌、孕、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盤催乳素、角蛋白等。

生物等級：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：

保藏機構(gòu)：ATCC; CCL-98 DSMZ; ACC-458 ECACC; 86082803；中國典型培養(yǎng)物保藏中心細(xì)胞庫

培養(yǎng)基：F-12K+10%FBS+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：~30 hours

STR鑒定位點Amelogenin：X，Y；CSF1PO：11，12；D13S317：9，11；D16S539：13，14；D18S51：14，16；D19S433：13，15；D21S11：30；D2S1338：21，24；D3S1358：15；D5S818：10，11；D7S820：10，12；D8S1179：12；FGA：22，23，24；TH01：9，9.3；TPOX：8；vWA：16；

驢透明質(zhì)酸(HA)elisa分析檢測試劑盒    HA ELISA Kit

人登革熱抗體IgM(DF-Ab IgM)elisa分析檢測試劑盒    DF-AbIgMELISAkit

P1噬菌體克隆鑒別試劑盒    乳酸脫氫酶（LDH）測試盒

大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)elisa檢測試劑盒    血清活性碳/葡聚糖處理試劑盒

ND4L抗體    MTND4L

22號染色體開放閱讀框36抗體   C22orf36

腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白2(TNFα-IP 2)抗體  Anti-TNFAIP2    視黃醇脫氫酶10抗體  Anti-RDH10

酪氨酸激酶B抗體  Anti-Trk B/NTRK2    磷酸化核突觸蛋白α抗體  Anti-phospho-Alpha synuclein (Tyr136)

APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgM    Rabbit Anti-Rat IgM / APC

細(xì)胞表面受體PILRβ抗體    PILRB

人α半乳糖基(α-Gal)elisa分析檢測試劑盒    α-GalELISAKit

豬L-乳酸脫氫酶(L-LDH)elisa分析檢測試劑盒    L-LDHELISAKit

大鼠泛素結(jié)合酶UBC5 elisa分析檢測試劑盒    Rat ubiquitin-conjugating enzyme UBC5 ELISA Kit

BEWO人胎盤絨毛膜癌細(xì)胞山羊骨堿性磷酸酶(BALP)elisa分析檢測試劑盒    BALPELISAKit

猴環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa分析檢測試劑盒    cAMP ELISA Kit

人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)elisa分析檢測試劑盒    FDFT1ELISAKit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。