商品屬性：

產(chǎn)品名稱	BT-474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞	英文名稱	BT-474:BT474
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X668	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來源	乳腺，乳腺導(dǎo)管癌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱：Bt-474; BT474；人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

種屬來源：人

年齡性別：女；60歲

組織來源：乳腺， ；乳腺導(dǎo)管癌

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：BT-474 [BT474]細(xì)胞是由E·Lasfargues和W·G·Coutinho從一個(gè)實(shí)心的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中分離到的細(xì)胞株

生物等級(jí)：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; CRL-7913 ATCC; HTB-20 BCRC; 60359 BCRJ; 0353 DSMZ; ACC-64 ；中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)****中心

培養(yǎng)基：89% RPMI-1640+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間：~84-100 hours

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

人電壓門控鉀通道(VGKC)elisa分析檢測(cè)試劑盒       VGKCELISAKit

細(xì)胞血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2（ACE2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒       人α酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)elisa分析檢測(cè)試劑盒

倉鼠白介素1α(IL-1α)elisa分析檢測(cè)試劑盒       IL-1α ELISA Kit

轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白2抗體       MTA2

微管蛋白β tubulin抗體 Tubulin β  Anti-tubulin Beta       環(huán)指蛋白139抗體  Anti-RNF139

大鼠白介素23(IL23)elisa檢測(cè)試劑盒       小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)elisa檢測(cè)試劑盒

FAM101B蛋白抗體      FAM101B

膜相關(guān)蛋白Numb抗體  Anti-NUMB       鞘氨醇激酶1抗體  Anti-SPHK1CAST1蛋白抗體       ERC2

環(huán)指蛋白107抗體 NIRF       肌醇單磷酸酶1單克隆抗體 IMPA1

Cy3標(biāo)記的兔抗雞IgM       Rabbit Anti-Chicken IgM / Cy3

人α-烯醇化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)elisa分析檢測(cè)試劑盒       HumanENO1ELISAkit

豬γ干擾素(IFN-γ)elisa分析檢測(cè)試劑盒       IFN-γELISAKit

大鼠分泌型球蛋白A(sIgA)elisa分析檢測(cè)試劑盒       sIgA ELISA Kit

BT-474人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞豚鼠白介素12(IL-12/P70)elisa分析檢測(cè)試劑盒       IL-12/P70ELISAKIT

組織型纖溶酶原激活蛋白抗體 TPA       1號(hào)染色體開放閱讀框131抗體 C1orf131