細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	C-33A人宮頸癌細(xì)胞	英文名稱	C-33A:C33A
產(chǎn)品貨號	A01X673	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	見說明	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱：C33A; C33a; C33-A; C-33-A; C-33A; C33；人頸癌細(xì)胞

種屬來源：人

年齡性別：女；66歲

組織來源：

生長特性：貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡介：C-33A細(xì)胞是由N·Auersperg從宮頸癌切片中建立的一系列細(xì)胞株中的一株。C-33 A細(xì)胞一開始就表現(xiàn)出亞二倍體核型及上皮細(xì)胞形態(tài)：，C-33 A細(xì)胞經(jīng)連續(xù)傳代可以觀察到核型不穩(wěn)定。C-33A細(xì)胞存在成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常；C-33 A細(xì)胞p53表達(dá)上調(diào)，且有一個273位密碼子的點(diǎn)突變導(dǎo)致Arg→Cys的替換。

生物等級：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：ATCC; HTB-31 ATCC; CRM-HTB-31 BCRC; 60554 BCRJ; 0348 ；中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)****中心

培養(yǎng)基：90%DMEM+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存

倍增時間：~32-48 hours

人補(bǔ)體片段3d(C3d)elisa分析檢測試劑盒       C3dELISAKit

小鼠垂草扁桃酸(VMA)elisa檢測試劑盒       大鼠C型鈉尿肽（CNP）elisa檢測試劑盒

魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa分析檢測試劑盒       hs-CRP ELISA Kit

核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體       NFAT1

細(xì)胞粘附分子1抗體  Anti-SynCAM/TSLC1       PSP抗體  Anti-Persephin

M. gastri RFLP基因分析試劑盒       人B群鏈球菌多糖抗體(IgG)elisa檢測試劑盒

7號染色體開放閱讀框29抗體      C7ORF29

骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體  Anti-OPG       沉默調(diào)節(jié)蛋白5抗體  Anti-SIRT5SAMD3蛋白抗體       SAMD3

人補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)elisa分析檢測試劑盒       HumanC1QTNF1ELISAKit

APC標(biāo)記的兔抗大鼠IgG H&L       Rabbit Anti-Rat IgG H&L / APC

人G蛋白偶聯(lián)膽汁酸受體1(GPBAR1)elisa分析檢測試劑盒       HumanGPBAR1ELISAKit

小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)elisa分析檢測試劑盒       HSPgp96ELISAKit

大鼠白介素32(IL-32)elisa分析檢測試劑盒       IL-32 ELISA Kit

C-33A人宮頸癌細(xì)胞人肌質(zhì)/內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP酶(ATP2A1)elisa分析檢測試劑盒       HumanATP2A1ELISAKit

魚黑色素elisa分析檢測試劑盒       Fish melanin ELISA kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。