細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	Caco-2人直腸癌細(xì)胞	英文名稱	NCIH596：NCI-H596
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB7255	培養(yǎng)條件	EMEM + 20% Foetal Bovine Serum
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來源	結(jié)直腸	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來源：人

年齡性別： 73 歲，男性

組織來源: 結(jié)直腸

生長特性： 貼壁生長

細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 凍存管

培養(yǎng)條件: EMEM + 20% Foetal Bovine Serum

凍存條件: 90% FBS + 10% DMSO

傳代方法：1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

人補(bǔ)體片斷3b(C3b)elisa分析檢測試劑盒       C3bELISAKit

小鼠白介素27(IL27)elisa檢測試劑盒       大鼠1,25二羥基維生素D3(1,25 DHVD3)elisa檢測試劑盒

魚類三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa分析檢測試劑盒       T3 ELISA Kit

E3泛素連接酶蛋白NEURL2抗體       NEURL2

腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體  Anti-TNFRSF12A/TWEAKR/CD266       干擾素誘導(dǎo)蛋白p58ipk抗體  Anti-p58ipk/DNAJC3

鈣鈉交換體（NCX）蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒       犬I 型膠原蛋白elisa檢測試劑盒

染色體卷曲螺旋域包含蛋白1抗體      GEMC1

腫瘤/睪丸抗原117  Anti-ANKRD45/CT117       膽固醇?；D(zhuǎn)移酶1抗體  Anti-SOAT1/ACAT1FAM190A蛋白抗體       FAM190A

鋅指蛋白744抗體       ANKZF1

PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgG H&L       Rabbit Anti-Rat IgG H&L / PE

人H5型禽流感病毒(H5N1)抗體(IgG)elisa分析檢測試劑盒       HumanH5N1antibodyIgGELISAKit

小鼠絨毛膜促性腺(CG)elisa分析檢測試劑盒       CGELISAKit

大鼠白介素4(IL-4)elisa分析檢測試劑盒       IL-4 ELISA KIT

Caco-2人直腸癌細(xì)胞人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa分析檢測試劑盒       MMP-1ELISAkit

肝細(xì)胞核因子4γ抗體       HNF4 gamma

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。