細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	CCD-1069Sk人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞	英文名稱	CCD-1069Sk
產(chǎn)品貨號	AXB6173	培養(yǎng)條件	IMDM+10%FBS，37 ℃, 5% CO2
生長特性	貼壁生長	細胞形態(tài)	纖維原細胞
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來源	乳腺組織的皮膚	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

種屬來源；人

組織來源；乳腺組織的皮膚

性別年齡；女性，70歲

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；纖維原細胞

細胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；IMDM+10%FBS，37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代

9號染色體開放閱讀框84抗體       C9orf84

精子形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體  Anti-TSARG7       蛋白激酶A抗體  Anti-PKA/PKAcat/PKACB

眼部白化病相關(guān)蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體       OA1

磷酸化乳腺癌抗雌耐藥蛋白1抗體       phospho-BCAR1 (Tyr751)

宮頸癌抑制蛋白4抗體  Anti-ZAK/HCCS4       磷酸化鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體  Anti-phospho-NHE3(Ser552)

肝糖原磷酸化酶抗體  Anti-PYGL       磷酸化絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶II β(casein kinase IIβ)抗體  Anti-phospho-CK II beta (Ser209)

DUX3蛋白抗體      DUX3

受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶5抗體  Anti-RIP5/RIPK5       神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK5抗體  Anti-SLITRK5人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa分析檢測試劑盒       Casp-12ELISAKit

錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體       ANKRD32

大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)elisa分析檢測試劑盒       SHC1 ELISA kit

DNA南方雜交印跡消除試劑盒       BL21DE3感受態(tài)細胞 20 x 100μl

微型RNA（miRNA）擴增試劑盒       小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)elisa檢測試劑盒

14號染色體開放閱讀框146抗體       LRFN5/C14orf146

CCD-1069Sk人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞腦蛋白CG6抗體       Brain protein CG6

高遷移率核小體結(jié)合蛋白1       HMG14

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。