
細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長(zhǎng)因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無(wú)污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代,注意消化時(shí)間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長(zhǎng)期存活和可用性?。
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號(hào) |
A01X688 |
凍存條件 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO |
產(chǎn)品分類 |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長(zhǎng)特性 |
貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱 |
CFPAC-1:CFPAC1 |
組織來(lái)源 |
胰腺管腺癌,肝轉(zhuǎn)移 |
商品介紹:
生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)培養(yǎng)基 IMDM+10% FBS+1% P/S
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 CFPAC-1細(xì)胞是胰腺管腺癌細(xì)胞系,建自26歲白人男性囊性纖維變性(CF)的肝轉(zhuǎn)移灶。CFPAC-1細(xì)胞表達(dá)囊性纖維變性跨膜調(diào)節(jié)因子(CFTR),CFPAC-1細(xì)胞形態(tài)為上皮細(xì)胞樣且頂端微絨毛極化。CFPAC-1細(xì)胞表達(dá)胰腺管細(xì)胞特征性的細(xì)胞角蛋白和癌胚抗原,倍增時(shí)間為30-32小時(shí)。CFPAC-1細(xì)胞是亞3倍體的細(xì)胞系,36%的細(xì)胞的染色體模式數(shù)為75。CFPAC-1細(xì)胞傳代至24代時(shí),可在抑制小鼠中致瘤。
年齡(性別) 男;26歲
組織來(lái)源 胰腺管腺癌,肝轉(zhuǎn)移
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 胰腺癌細(xì)胞
生物等級(jí) 1
倍增時(shí)間 ~30-45 hours
致瘤性 Yes, in nude mice (passage 34)
抗原表達(dá)情況 CA19-9 antigen, 12000 units/mL, epithelial keratins
基因表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA), 9ng/mL; pancreatic oncofetal antigen (POA), 28ng/mL; adenocarcinoma associated antigen (ACAA), 5000ng/mL; CA 19-9 antigen, 12000 units/mL; epithelial keratins
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-1918 ECACC; 91112501
?公司正在出售的產(chǎn)品:
熱休克蛋白J1抗體 HSJ1
髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2抗體 Anti-TREM2 孕酮誘導(dǎo)阻斷因子1抗體 Anti-PIBF1/C13orf24
磷酸化心臟磷蛋白(Ser16+Thr17)抗體 phospho-PLB (Ser16+Thr17)
Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG H&L Rabbit Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy5.5
著絲粒蛋白抗體 Anti-ZW10 peptide 磷酸化KB抑制蛋白β抗體 Anti-Phospho-IKB beta (Ser23)
26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體 Anti-PSMC1/Proteasome 19S S4 鱗狀細(xì)胞相關(guān)蛋白抗體 Anti-SCRO/DCUN1D1
磷酸化組蛋白去乙酰化酶8抗體 phospho-HDAC8 (Ser39)
環(huán)指蛋白56 Anti-RNF56/CBLB 碳酸氫鈉協(xié)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4突變型抗體 Anti-SLC4A4 variant A人脯氨酸羥化酶(PHD)elisa分析檢測(cè)試劑盒 HumanPHDELISAKit
9號(hào)染色體開放閱讀框23抗體 C9orf23
大鼠17-α甲睪酮(17-αMT)elisa分析檢測(cè)試劑盒 17-αMT ELISA Kit
人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)elisa分析檢測(cè)試劑盒 伊紅甲基藍(lán)(EMB)革蘭氏陰性選擇瓊脂平板
小鼠組織蛋白酶D(CTSD)elisa檢測(cè)試劑盒 大鼠葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)elisa檢測(cè)試劑盒
MFSD10蛋白抗體 MFSD10
CFPAC-1人胰腺癌細(xì)胞唐氏綜合癥細(xì)胞粘附分子2抗體 DSCAML1
NPIP樣蛋白1抗體 NPIP-like protein 1
培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。