細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	COLO-60H人結(jié)腸癌細(xì)胞	英文名稱	COLO-60H
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB6200	培養(yǎng)條件	DMEM:Ham's F12 + 3.1 g/L Glucose + 1.6 mM L-Glutamine + 15 mM HEPES + 1.0 mM Sodium pyruvate + 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820400a) + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來源	結(jié)腸	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來源；人

組織來源；結(jié)腸

性別年齡；男性，73歲

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮樣

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；DMEM:Ham's F12 + 3.1 g/L Glucose + 1.6 mM L-Glutamine + 15 mM HEPES + 1.0 mM Sodium pyruvate + 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion article number 820400a) + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3傳代, 3-5天傳1代

PYROXD2蛋白抗體 PYROXD2       Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 RPH3AL

21號(hào)染色體開放閱讀框66抗體 C21orf66       5號(hào)染色體開放閱讀框34抗體 C5orf34

羧基端小結(jié)構(gòu)域磷酸酶2抗體 CTDSP2       調(diào)節(jié)因子X結(jié)合蛋白R(shí)FXAP抗體 RFXAP

血小板白細(xì)胞C激酶底物源結(jié)構(gòu)域M3抗體 PLEKHM3       液泡蛋白分選蛋白37C抗體 VPS37C

FITC標(biāo)記人CD28單克隆抗體 human CD28/FITC       FLJ42569蛋白抗體 FLJ42569

肌微管素相關(guān)蛋白4抗體 MTMR4       脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體 ATX2

低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體 ARH      短卷曲螺旋蛋白SCOC抗體 SCOC

硫酸酯酶修飾因子1抗體 SUMF1       腦啡肽酶2抗體 Neprilysin 2小鼠β-防御素2（β-BD-2）elisa檢測試劑盒       磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶試劑盒

8號(hào)染色體開放閱讀框77抗體       C8orf77

白藜蘆醇含量測試盒       細(xì)胞TSH-BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒

組織GRK5激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）       人高半胱氨酸(Hcy)elisa分析檢測試劑盒

大鼠胱抑素D(CST5)elisa檢測試劑盒       植物(擬南芥)超氧化物歧化酶[鐵],葉綠體(SODB)elisa檢測試劑盒

小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa分析檢測試劑盒       大鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)elisa檢測試劑盒

COLO-60H人結(jié)腸癌細(xì)胞人血液轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRANSFERRIN）比濁法定量檢測試劑盒       人α-防御素4(NP-4)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測

NLRP13蛋白抗體       NLRP13

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。