細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞	英文名稱	COV434:COV434
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X694	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長(zhǎng)特性	貼壁（有聚團(tuán)）	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來(lái)源	說(shuō)明書(shū)	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 貼壁（有聚團(tuán)）

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 DMEM+ 2mM Glutamine＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 卵巢癌細(xì)胞

保藏機(jī)構(gòu) ECACC; 07071909

通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體       GTF2A1 alpha

磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體  Anti-phospho-TIRAP(Tyr86)       磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體  Anti-Phospho-PERK(Thr980)

軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子B受體抗體       Nogo B receptor

磷酸化心臟磷蛋白抗體       phospho-PLB (Thr17)

野生型P53誘導(dǎo)基因1抗體  Anti-WIG-1/PAG608       神經(jīng)元特異性蛋白家族成員2抗體  Anti-NSG2/HMP19

穿孔素抗體  Anti-Perforin       細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白2抗體  Anti-Sidekick 2

嗅覺(jué)受體5AR1抗體      OR5AR1

環(huán)指蛋白24抗體  Anti-RNF24       SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體  Anti-SHIP1人黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)elisa分析檢測(cè)試劑盒       MART/Melan-AELISAKit

DjC8蛋白抗體       DjC8

大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa分析檢測(cè)試劑盒       BACE1 ELISA Kit

小鼠原肌球調(diào)節(jié)蛋白3(TMOD3)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠催產(chǎn)素受體(OXTR)elisa檢測(cè)試劑盒

血液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒       人并殖吸蟲(chóng)抗體(IgM)elisa檢測(cè)試劑盒

LHX8蛋白抗體       LHX8

COV434人卵巢顆粒腫瘤細(xì)胞CROC4抗體       CROC4

單核細(xì)胞趨化蛋白2抗體(小鼠)       MCP-2

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。