細(xì)胞系實(shí)驗(yàn)步驟：

?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?：
?生物柜的使用?：確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外，防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?：提供細(xì)胞生長的環(huán)境，保持恒定的溫度（通常為37℃）?。
?培養(yǎng)基和血清?：特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì)，如糖、氨基酸和維生素，添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?：
?細(xì)胞接收與記錄?：記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息，包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?：定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為，確保細(xì)胞狀態(tài)健康，無污染?。
?細(xì)胞傳代?：當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時(shí)進(jìn)行傳代，注意消化時(shí)間和條件，避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?：
?細(xì)胞系鑒定?：通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征，防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?：定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存，確保細(xì)胞的長期存活和可用性?。

本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

商品屬性：

產(chǎn)品貨號	A01X697	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
產(chǎn)品分類	人細(xì)胞系	產(chǎn)品種屬	人
生長特性	半貼半懸	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
英文名稱	D283 Med:D283 Med	組織來源	腦組織

商品介紹：

生長特性 半貼半懸

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

生長培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO?，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 D283 Med細(xì)胞是由Frien等人于1985年建系，源自一名6歲患有神經(jīng)管細(xì)胞瘤有腹腔轉(zhuǎn)移的白人男性小孩的腹水細(xì)胞。

年齡（性別） 男；6歲

組織來源 腦組織

細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類型 成髓瘤細(xì)胞

生物等級 1

倍增時(shí)間 ~52 hours

致瘤性 Yes, in nude mice(The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.)Yes, in soft agar

基因表達(dá)情況 The cells produce tumors in nude mice and the resulting tumors are glutamine synthetase positive; neuron specific enolase positive; glial fibrillary acidic proteins negative; S100 (S-100) protein negative; The cells express elevated levels of four biochemical markers of SCLC (neuron specific enolase; the brain isoenzyme of creatine kinase; L-DOPA decarboxylase; bombesin-like immunoreactivity)

保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-185IZSLER; BS TCL 203KCB; KCB 2010201YJ

?公司正在出售的產(chǎn)品：

線粒體乙酰化酶3抗體 [KO驗(yàn)證抗體] SIRT3       心肌營養(yǎng)素1抗體 CT-1

磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體 Phospho-PKC gamma (Thr514)       磷酸化緊密連接蛋白6抗體 phospho-Claudin 6 (Tyr219)

胞質(zhì)動力蛋白輕鏈中間體1抗體 DNCLI1       補(bǔ)體因子H重組兔單克隆抗體 CFH

核仁蛋白9抗體 NOL9       核轉(zhuǎn)錄因子YB抗體 NFYB

少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子1抗體 OLIG1       神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN3抗體 CLN3

CD44v7抗體 CD44v7       CXXC型鋅指蛋白4抗體 CXXC4

軸突生長誘向因子G1/神經(jīng)突起生長導(dǎo)向因子G1抗體 Netrin-G1      轉(zhuǎn)錄因子HES-1抗體 HES1

MTO1蛋白抗體 MTO1       O-唾液酸糖蛋白內(nèi)肽酶抗體 OSGEP蘋果酸含量測試盒       酵母甘肽過氧化物酶（GSH PX）活性比色法定量檢測試劑盒

細(xì)胞角蛋白15重組兔單克隆抗體       Cytokeratin 15

大鼠白介素2可溶性受體β鏈(sIL-2Rβ)elisa檢測試劑盒       小鼠降鈣素(CT)elisa分析檢測試劑盒

脂肪酶（LPS)測試盒       大鼠糖原磷酸化酶工酶II(GP-II)elisa檢測試劑盒

植物葉綠體總蛋白定量檢測試劑盒       線粒體呼吸鏈復(fù)合物 Ⅴ 活性測試盒 20管/10樣 生化法

人補(bǔ)體C1q（C1q）elisa檢測試劑盒       血液磷酸二酯酶（PDE）總活性熒光定量檢測試劑盒

D283 Med人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞小鼠糖皮質(zhì)受體β(GR-β)elisa分析檢測試劑盒       大鼠堿性磷酸酶(ALP)elisa檢測試劑盒

LYRM2蛋白抗體       LYRM2

培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。 
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。 
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。 
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。 
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。 
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。 
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。 
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后次傳代建議 1：2 傳代 。 
9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。