細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞	英文名稱	FTC-133:FTC133
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X714	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	甲狀腺	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱：FTC-133，人甲狀腺癌細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：42歲

組織來(lái)源：甲狀腺

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：FTC-133人細(xì)胞源自一名42歲患有濾泡狀甲狀腺癌的男性的結(jié)轉(zhuǎn)移灶。表達(dá)甲狀腺球蛋白、EGFR，P53突變，碘131輻射可使FTC-133細(xì)胞攝碘能力下降。

使用權(quán)限:A類

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所細(xì)胞資源中心

培養(yǎng)基：90% 1640+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間：

STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X,X；CSF1PO：10,10；D12S391：21,22；D13S317：11,11；D16S539：11,11；D18S51：11,11；D19S433：12,13；D21S11：32.2,32.2；D2S1338：20,20；D3S1358：15,15；D5S818：12,12；D6S1043：19,19；D7S820：9,10；D8S1179：10,10；FGA：21,21；Penta E：13,13；TH01：9.3,9.3；TPOX：9,9；vWA：15,18；

EMSY蛋白抗體 EMSY       FAM194B蛋白抗體 FAM194B

鋅指蛋白90抗體 ZFP90       胸腺素β4抗體 Thymosin beta 4

磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 Phospho-CEBP beta (Thr235)       硫酸乙酰肝素6腦苷脂轉(zhuǎn)硫酸酶1抗體 HS6ST1

絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶H2抗體 PSKH2       絲裂原活化蛋白激酶相互作用蛋白1抗體 MAP2K1IP1

14-3-3 sigm重組兔單克隆抗體 14-3-3 sigma       1號(hào)染色體開放閱讀框2抗體 C1orf2

促黃體誘導(dǎo)蛋白抗體 StAR       蛋氨酸氨肽酶2抗體 Methionine Aminopeptidase 2

PEST含核蛋白抗體 PCNP      PE標(biāo)記小鼠F4/80單克隆抗體 mouse F4/80/PE

環(huán)指蛋白1抗體 RING1       基質(zhì)重塑相關(guān)蛋白7抗體 MXRA7牛乳過氧化物酶(LPO)elisa分析檢測(cè)試劑盒       血液過氧化氫（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞色素P450 2F1抗體       CYP2F1

大鼠白介素2受體(IL-2R)elisa檢測(cè)試劑盒       小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)elisa檢測(cè)試劑盒

土壤多酚氧化酶（PPO）測(cè)試盒       大鼠胃泌素（GAS）elisa檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞色素P450亞酶CYP2B2（PROD）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒       小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人波形蛋白（VIM）elisa檢測(cè)試劑盒       /酵母甲羥戊酸激酶（mevalonate kinase）活性比色法

FTC-133人甲狀腺癌細(xì)胞小鼠維生素B12(VB12)elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白5(MIP-5)elisa檢測(cè)試劑盒

LRWD1蛋白抗體       LRWD1

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。