商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	H22小鼠肝癌細(xì)胞	英文名稱(chēng)	H22:H22
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X1055	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長(zhǎng)特性	懸浮細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	母細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來(lái)源	肝；肝癌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項(xiàng) H22細(xì)胞是小鼠腹水瘤細(xì)胞，體外培養(yǎng)傳代4-5代左右，細(xì)胞活力會(huì)將低，狀態(tài)會(huì)變差，可通過(guò)腹水培養(yǎng)恢復(fù)細(xì)胞活力。該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞，請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液；請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

背景描述 H22細(xì)胞是分離自小鼠腹水，由大連醫(yī)科學(xué)院建立。

年齡（性別） 不詳

組織來(lái)源 肝；肝癌

細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類(lèi)型 肝膽癌細(xì)胞

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體       APLP2

微型RNA（miRNA）表達(dá)載體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒       小鼠胱天蛋白酶7(Casp-7)elisa分析檢測(cè)試劑盒

整聯(lián)蛋白重復(fù)蛋白2抗體       ITFG2/MDS028

mRNA結(jié)合蛋白抗體       RAE1

堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1抗體  Anti-bFGFR/FGFR1       細(xì)胞膜鈣ATP酶1抗體  Anti-PMCA1

快速姬姆薩染液適用于瘧原蟲(chóng)染色 30ml×2、60ml×1 250ml×4 500ml×4       細(xì)胞蘇木素伊紅染色試劑盒

著絲粒蛋白M抗體      CENPM

原鈣粘附蛋白11Y抗體  Anti-PCDH11Y       14-3-3γ抗體  Anti-14-3-3 gammaZDHHC24蛋白抗體       ZDHHC24

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框98抗體       C9orf98

PE-CY5標(biāo)記的羊抗兔IgG H&L       Goat Anti-Rabbit IgG H&L / PE-Cy5

牛維生素D(VD)elisa分析檢測(cè)試劑盒       VD ELISA Kit

小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(c-MET/HGFR)elisa分析檢測(cè)試劑盒       C-MET/HGFRELISAKit

脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)elisa分析檢測(cè)試劑盒       Lp-PLA2 ELISA Kit

H22小鼠肝癌細(xì)胞人低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)elisa分析檢測(cè)試劑盒       HumanHIF-3αELISAKit

增食欲素A/欲A抗體       Orexin A