細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	HCC-1195人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞	英文名稱	HCC-1195
產(chǎn)品貨號	AXB6277	培養(yǎng)條件	RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來源	肺	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

種屬來源；人

組織來源；肺

性別年齡；男性，47歲

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；RPMI 1640 + 10% fetal bovine serum (FBS)+1%P/S37 ℃, 5% CO2

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3傳代, 2-3天傳1代

橋粒糖蛋白4抗體       Desmocollin 4

沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體  Anti-SIRT1       鳥嘌呤核苷酸交換因子抗體  Anti-RCBTB1/CLLD7

MAP7D3蛋白抗體       MAP7D3

TIP30蛋白抗體       TIP30

脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體  Anti-SH3TC2       修補相關(guān)蛋白PTCHD3抗體  Anti-PTCHD3

核仁蛋白C23抗體  Anti-Nucleolin/C23       信號通路Wnt5a抗體  Anti-WNT5A

死亡因子4樣蛋白2抗體      Mortality Factor 4 like 2

親環(huán)蛋白（親環(huán)素）PPIG抗體  Anti-PPIG       干燥綜合征相關(guān)蛋白2抗體  Anti-TROVE-2/SSA2糖基轉(zhuǎn)移酶樣1抗體       GTDC1

人程序性細(xì)胞死亡因子4(PDCD4)elisa分析檢測試劑盒       HumanPDCD4ELISAKit

FITC標(biāo)記小鼠IgG（型對照)       Mouse IgG / FITC

大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa分析檢測試劑盒       SDF-1β ELISA Kit

小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)elisa分析檢測試劑盒       ColⅣELISAKIT

Hermansky-Pudlak綜合征蛋白3抗體       HPS3

HCC-1195人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞細(xì)胞分裂周期蛋白16抗體       APC6

魚胰島素樣生長因子1(IGF-1)elisa分析檢測試劑盒       IGF-1 ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存。