
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
NG10815108CC15:NG108-15 [108CC15]
產(chǎn)品貨號(hào)
AXB6285
培養(yǎng)條件
RPMI-1640+10%fetal bovine serum+300mg/L L-Glutamine+25mM HEPES+25mM NaHCO3+1%P/S37 ℃, 5% CO2
生長(zhǎng)特性
貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
90% FBS + 10% DMSO
組織來(lái)源
肺
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
種屬來(lái)源:人
性別年齡: 63 歲,女性
組織來(lái)源:肺
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞規(guī)格: 1 X 10 6cells/T25 或 1 mL 凍存管
培養(yǎng)條件: RPMI-1640+10%fetal bovine serum+300mg/L L-Glutamine+25mM HEPES+25mM NaHCO3+1%P/S37 ℃, 5% CO2
凍存條件: 90% FBS + 10% DMSO
傳代方法:1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無(wú)菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過(guò)度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框191抗體 C1orf191
膜電位依賴性純化線粒體氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測(cè)定試劑盒 大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)elisa檢測(cè)試劑盒
白細(xì)胞介素28受體α抗體 IL28 Receptor alpha
轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體 POU6F2
尿苷酰二磷酸葡萄糖焦磷化酶2抗體 Anti-UGP2 P選擇素糖蛋白配體1抗體 Anti-PSGL-1/CD162
基因檢測(cè)試劑盒 小鼠β萘酚(β-naphthol)elisa分析檢測(cè)試劑盒
環(huán)指蛋白217抗體 IBRDC1
前列腺素F2a受體抗體PGF2αR Anti-PTGFR 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 Anti-phospho-SOX9(Ser181)FOXD4L1蛋白抗體 FOXD4L1
梅克爾憩室綜合征相關(guān)蛋白5抗體 RPGRIP1L 鈉通道蛋白8α抗體 SCN8A/Nav1.6
PE-CY5標(biāo)記的羊抗牛IgG H&L Goat Anti-Bovine IgG H&L / PE-Cy5
犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa分析檢測(cè)試劑盒 BMG/β2-MG ELISA Kit
小鼠環(huán)磷酸腺苷(cAMP)elisa分析檢測(cè)試劑盒 cAMPELISAKit
猴絨毛膜促性腺(CG)elisa分析檢測(cè)試劑盒 CG ELISA kit
HCC-1588人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞人非小細(xì)胞肺癌相關(guān)抗原211(CA211)elisa分析檢測(cè)試劑盒 CA211ELISAkit
FKRP蛋白抗體 FKRP GLCNE蛋白抗體 GLCNE