細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	HCT116+LUC人結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記	英文名稱	HCT116+LUC:HCT116LUC
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X736	培養(yǎng)條件
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	詳見(jiàn)說(shuō)明
組織來(lái)源	結(jié)直腸癌	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞介紹

HCT116是1979年M.Brattain等從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞之一。 在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克隆。HCT116在無(wú)胸腺的裸鼠有致瘤性，形成上皮樣的腫瘤。

該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶luc基因。

細(xì)胞特性

1） 來(lái)源：結(jié)直腸癌

2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)

3） 含量：>1×10? 細(xì)胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

16號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體       C16orf48

PSD95結(jié)合蛋白2抗體  Anti-SAPAP2/DLGAP2       RFESD蛋白抗體  Anti-RFESD

黑色素瘤相關(guān)抗原B2抗體       MAGEB2

T細(xì)胞急性母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原1抗體       TALLA-1

細(xì)胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體  Anti-SPON2/M spondin/Mindin       磷酸化蛋白激酶C抗體  Anti-phospho-PRKCA(Thr637)

核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體  Anti-NUSAP1       X射線修復(fù)交叉互補(bǔ)蛋白4抗體  Anti-XRCC4

皮膚T細(xì)胞瘤相關(guān)抗原5抗體      CTAGE5

凋亡相關(guān)蛋白4抗體  Anti-PDCD4       tRNA剪接內(nèi)切酶2抗體  Anti-TSEN2G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白抗體       GPR85

人程序性死亡因子配體1(PD-L1/CD274)elisa分析檢測(cè)試劑盒       HumanPD-L1ELISAKit

PE標(biāo)記豚鼠IgM       Guinea pig IgM / PE

大鼠膠原C末端肽(CTX)elisa分析檢測(cè)試劑盒       CTX ELISA Kit

小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)elisa分析檢測(cè)試劑盒       CCR-6ELISAKit

組織相容性抗原DRB4抗體       HLA-DRB4

HCT116+LUC人結(jié)腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記α/β水解酶4抗體       ABHD4

魚胰島素受體α亞基(ISR-α)elisa分析檢測(cè)試劑盒       ISR-α ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。