
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
HCT116:HCT116
產(chǎn)品貨號
A01X735
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%,
生長特性
貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源
結(jié)直腸癌
用途
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
商品詳情:
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長培養(yǎng)基:
McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 HCT 116細(xì)胞是由M·Brattain等人于1979年從患結(jié)腸癌的男性病人中分離的三株惡性細(xì)胞中的一株。HCT 116細(xì)胞在半固體瓊脂糖培養(yǎng)基中形成克??;HCT 116細(xì)胞在無胸腺裸鼠有致瘤性,形成腫瘤結(jié)節(jié)。
年齡(性別) 男性;
組織來源 結(jié)直腸癌
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 腸癌細(xì)胞
生物等級 BSL-1
倍增時間 ~25-48 hours
致瘤性 Yes, in nude mice.
基因表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 1 ng per 1×10^6 cells per 10 days.
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CCL-247 BCRC; 60349 BCRJ; 0288 DSMZ; ACC-581

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

RALYL蛋白抗體 RALYL Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 ROCK1
2號染色體開放閱抗體 C2orf43 6號染色體開放閱讀框173抗體 C6ORF173
碳酸酐酶4抗體 CAIV/Carbonic Anhydrase IV 源盒蛋白HOX13抗體 HoxC13
煙堿型乙酰膽堿受體α5抗體 CHRNA5 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3重組兔單克隆抗體 IGFBP3
FITC標(biāo)記小鼠CD117單克隆抗體 mouse CD117(c-Kit)/FITC Fyn結(jié)合蛋白抗體 ADAP/FYB
基質(zhì)金屬蛋白酶21抗體 MMP21 甲精結(jié)合蛋白17抗體 FBP17
電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體 CACNA1G + CACNA1H 多瘤病毒增強(qiáng)了結(jié)合蛋白2β抗體 CBFb
氯離子通道蛋白3抗體 CLCN3 鈉離子通道調(diào)節(jié)蛋白1抗體 SCNM1猴白介素1a(IL1A)elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測 胰(TRYPSIN)酶解法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒
人蛋白ATP1B4(ATP1B4)elisa分析檢測試劑盒 HumanATP1B4ELISAKit
大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa檢測試劑盒 小鼠抵抗素(Resistin)elisa檢測試劑盒
小鼠循環(huán)復(fù)合物(CIC)elisa檢測試劑盒 大鼠類風(fēng)濕因子(RF)elisa檢測試劑盒
血液乙酰酯酶活性熒光法定量檢測試劑盒 食蟹猴C肽(C-Peptide)elisa檢測試劑盒
人S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物(S100A8/A9)elisa分析檢測試劑盒 3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶待測樣品制備試劑盒
HCT116人結(jié)腸癌細(xì)胞小鼠連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)elisa檢測試劑盒 大鼠肺癌腫瘤抑制因子1(TSLC1)elisa分析檢測試劑盒
皮質(zhì)醇(Cortisol)elisa分析檢測試劑盒 Whale Cortisol ELISA Kit