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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:HEL 299 正常胎兒肺纖維細胞

  • 產(chǎn)品型號:AXB7329
  • 產(chǎn)品廠商:撫生
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
HEL 299 正常胎兒肺纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品:U87MG+RFP人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤+RFP 磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 Anti-Phospho-TLK1(Ser695) 驢抗羊IgG H&L Donkey Anti-Goat IgG H&L Bovine Insulin ELISA kit
詳情介紹:

細胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細胞:以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,使細胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


商品屬性:

產(chǎn)品名稱

HEL 299   正常胎兒肺纖維細胞

英文名稱

HEL299:HEL 299

產(chǎn)品貨號

AXB7329

培養(yǎng)條件

:  EMEM +10% fetal bovine serum

生長特性

貼壁生長

細胞形態(tài)

成纖維細胞

產(chǎn)品種屬

凍存條件

90% FBS + 10% DMSO

組織來源

用途

僅供科研研究實驗

商品詳情:


種屬來源:人

性別年齡:男性

組織來源:  肺

生長特性: 貼壁生長

細胞形態(tài):  成纖維細胞

細胞規(guī)格:  1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件:  EMEM +10% fetal bovine serum

凍存條件:  90% FBS + 10% DMSO

傳代方法:1:3傳代, 2-3天傳1代


公司正在出售的產(chǎn)品:


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細胞傳代培養(yǎng)操作步驟:
(1)當(dāng)顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時,進行傳代。
(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細胞,吹打細胞使其均勻分散。
(7)吸棄細胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細胞凍存。


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