細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	HEL人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞	英文名稱(chēng)	HEL:HEL
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X745	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長(zhǎng)特性	半貼半懸	細(xì)胞形態(tài)	母細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來(lái)源	外周血	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

生長(zhǎng)特性 半貼半懸

細(xì)胞形態(tài) 母細(xì)胞樣

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 HEL細(xì)胞是一株母細(xì)胞樣細(xì)胞株，源自一位30歲白人男性；該患者患有惡性紅細(xì)胞白血病，能夠自然產(chǎn)生并能誘導(dǎo)球蛋白合成。HEL細(xì)胞的EB病毒核抗原陰性，沒(méi)有表面球蛋白與細(xì)胞質(zhì)球蛋白。HEL細(xì)胞表達(dá)HLA抗原(HLA-A3、AW32、BW35)，β-2小球蛋白，一定比例的細(xì)胞還表達(dá)La抗原。HEL細(xì)胞提供了一種用于研究紅細(xì)胞分化和球蛋白基因表達(dá)的模型，它類(lèi)似于小鼠中的血友病。

年齡（性別） 男

組織來(lái)源 外周血

細(xì)胞類(lèi)型 腫瘤細(xì)胞

腫瘤類(lèi)型 白血病細(xì)胞

MCCC2蛋白抗體 MCCC2       NADH復(fù)合體6抗體 MT-ND6

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA1抗體 GDIA1       轉(zhuǎn)鈷胺素蛋白2抗體 TCN2

軟骨肉瘤相關(guān)蛋白2抗體 RED       神經(jīng)降壓素受體2抗體 Neurotensin Receptor 2

線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄終止因子樣蛋白MTERFD3抗體 MTERFD3       心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白1抗體 HAND1

CD53抗體 CD53       Cyclin A1相互作用蛋白抗體 PROCA1

谷氨酸受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體 NARG2       果糖-2,6-二磷酸酶2/磷酸果糖激酶2抗體 PFKFB2/PFK2

白介素2抗體 IL-2      伴侶蛋白9抗體 CPNE9

磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 phospho-eIF4EBP1（Thr70）       磷酸化磷脂酰肌醇激酶3催化亞單位3抗體 phospho-PIK3C3 (Ser164)大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)elisa分析檢測(cè)試劑盒       小鼠可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)elisa檢測(cè)試劑盒

銜接蛋白β抗體       AP2 beta

冰凍切片黑色素去色試劑盒       犬癌胚抗原(CEA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人甲狀腺素抗體(TAb)elisa分析檢測(cè)試劑盒       烘賠食物L-天化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒

豬Tau蛋白elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠膽固醇(CH)elisa檢測(cè)試劑盒       小鼠血管**素2(ANG-2)elisa檢測(cè)試劑盒

HEL人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)elisa分析檢測(cè)試劑盒       組織磷脂酶C（Phospholipase C）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒

異質(zhì)核糖核蛋白H抗體       hnRNP H

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。