細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	HFL1（人胚肺成纖維細胞）	英文名稱	HFL
產(chǎn)品貨號	AXB9824	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長特性	貼壁生長	細胞形態(tài)	成纖維細胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無血清凍存液，液氮儲存
組織來源	肺	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞別稱；HFL-1; HFL 1; Human fetal lung fibroblast 1; HFL；人胚肺成纖維細胞

種屬來源；人

年齡性別；男；胎兒

組織來源；肺

生長特性；貼壁生長

細胞形態(tài)；成纖維細胞樣

細胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景介紹；正常胎兒肺成纖維細胞，核型正常，HFL-1細胞為有限細胞系。

STR位點；Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16

生物等級；1

細胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

支原體檢測；無

保藏機構(gòu)；ATCC; CCL-153 BCRC; 60299 ECACC; 89071902；中國科學院分子細胞科學****中心

培養(yǎng)基；F12K+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無血清凍存液，液氮儲存

人白三烯D4(LTD4)elisa分析檢測試劑盒       LTD4ELISAKit

組織基質(zhì)金屬（MMP-12）活性熒光定量檢測試劑盒       人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)elisa分析檢測試劑盒

鴨白介素1(IL-1)elisa分析檢測試劑盒       IL-1 ELISA Kit

類固醇脫氫酶樣蛋白NSDHL抗體       NSDHL

環(huán)指蛋白105抗體  Anti-TTC3/RNF105       突觸后密度蛋白95抗體  Anti-PSD95/post-synaptic density protein 95

大鼠肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa分析檢測試劑盒       魚超氧化物歧化酶(SOD)elisa分析檢測試劑盒

9號染色體開放閱讀框5抗體      C9orf5

磷酸吡哆醇氧化酶抗體  Anti-PNPO       絲氨酸蛋白酶抑制劑B3抗體  Anti-SERPINB3唾液酸結(jié)合性球蛋白樣凝集素14抗體       SIGLEC14

FLJ39060蛋白抗體       FLJ39060

PE-Cy5.5標記的小鼠抗兔IgM       Mouse Anti-Rabbit IgM / PE-Cy5.5

人CD45分子(CD45)elisa分析檢測試劑盒       HumanCD45ELISAKit

小鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(visfatin)elisa分析檢測試劑盒       MousevisfatinELISAKit

大鼠α2-HS糖蛋白(AHSG)elisa分析檢測試劑盒       AHSG ELISA Kit

HFL1（人胚肺成纖維細胞）人過氧化脂質(zhì)(LPO)elisa分析檢測試劑盒       LPOELISAkit

NAGPA蛋白抗體       NAGPA

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。