
本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
商品屬性:
產(chǎn)品貨號 |
A01X759 |
凍存條件 |
詳見說明 |
產(chǎn)品分類 |
人細(xì)胞系 |
產(chǎn)品種屬 |
人 |
生長特性 |
貼壁生長 |
細(xì)胞形態(tài) |
上皮細(xì)胞樣 |
英文名稱 |
HGC-27+YFP:HGC27YFP |
組織來源 |
人胃癌 |
商品介紹:
細(xì)胞介紹:
該細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶 YFP 基因。
細(xì)胞特性
1) 來源:人胃癌
2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長
3) 含量:>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25 瓶或者 1mL 凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
細(xì)胞篩選:
該細(xì)胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 YFP 的細(xì)胞,隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,其 YFP 熒光強(qiáng)度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強(qiáng)度,可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。 建議收到細(xì)胞后至少傳 3 代,凍存留種后再進(jìn)行篩選。
初次進(jìn)行細(xì)胞篩選時,建議加入終濃度為 1ug/ml 嘌呤霉素的培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細(xì)胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含 2ug/ml 嘌呤霉素的培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至高濃度為 5ug/ml。
若篩選過程中,漂浮細(xì)胞大于 60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細(xì)胞密度約 80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進(jìn)行篩選。當(dāng)加入 5ug/ml嘌呤霉素時細(xì)胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
培養(yǎng)注意事項 :
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的完全培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議 1:2 傳代 。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
細(xì)胞系實驗步驟:
?一、細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備?:
?生物柜的使用?:確保所有接觸細(xì)胞的物品都在生物柜中通過紫外,防止污染?。
?培養(yǎng)皿和培養(yǎng)瓶?:提供細(xì)胞生長的環(huán)境,保持恒定的溫度(通常為37℃)?。
?培養(yǎng)基和血清?:特制的培養(yǎng)基包含各種營養(yǎng)物質(zhì),如糖、氨基酸和維生素,添加胎牛血清和雙抗以提供生長因子和防止污染?。
?二、細(xì)胞培養(yǎng)過程?:
?細(xì)胞接收與記錄?:記錄細(xì)胞系的相關(guān)信息,包括背景信息、傳代培養(yǎng)、冷凍保存等?。
?細(xì)胞形態(tài)觀察?:定期檢查細(xì)胞的形態(tài)和行為,確保細(xì)胞狀態(tài)健康,無污染?。
?細(xì)胞傳代?:當(dāng)細(xì)胞密度超過80%時進(jìn)行傳代,注意消化時間和條件,避免細(xì)胞損傷?。
三、?細(xì)胞系鑒定與維護(hù)?:
?細(xì)胞系鑒定?:通過STR圖譜確定細(xì)胞的遺傳特征,防止細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染?。
?細(xì)胞保存與管理?:定期進(jìn)行細(xì)胞冷凍保存,確保細(xì)胞的長期存活和可用性?。
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