細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	HGC-27人胃癌細(xì)胞	英文名稱(chēng)	HGC-27:HGC27
產(chǎn)品貨號(hào)	A01X758	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	胃，結(jié)轉(zhuǎn)移	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱(chēng)：HGC27；HGC-27；人胃癌細(xì)胞

種屬來(lái)源：人

年齡性別：

組織來(lái)源：胃，結(jié)轉(zhuǎn)移

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

背景簡(jiǎn)介：HGC-27細(xì)胞源自未分化胃癌組織，能分泌粘液素。

生物等級(jí)：

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：無(wú)

基因表達(dá)情況：

保藏機(jī)構(gòu)：中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)

培養(yǎng)基：89%DMEM+10%FBS+1%PS

培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件：無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

倍增時(shí)間：

STR鑒定位點(diǎn)Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：10，11；D16S539：10，11；D18S51：16，17；D19S433：14；D21S11：30，33，34；D2S1338：22，24；D3S1358：17，17.3；D5S818：OL，12；D7S820：11，12，13；D8S1179：8.2，10，11，16；FGA：22；TH01：9；TPOX：8；vWA：14；

Mob1源蛋白MOBKL2C抗體 MOBKL2C       NDUFB8蛋白抗體 NDUFB8

周期素依賴(lài)性激酶2重組兔單克隆抗體 Cdk2       轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體 PATZ1

色氨酸豐富蛋白抗體 WRB       神經(jīng)肽Y受體4抗體 NPY4R

腺泡狀軟組織肉瘤結(jié)構(gòu)域蛋白ASPC抗體 ASPSCR1       鋅指蛋白175抗體 ZNF175

cereblon蛋白抗體 CRBN       DHTKD1蛋白抗體 DHTKD1

谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶抗體 GST1       海棠(植物) 14-3-3蛋白抗體 14-3-3 family protein

白細(xì)胞介素28抗體 IL-28      苯丙氨酸羥化酶4單克隆抗體 PAH

磷酸化p21激活激酶1/3抗體 phospho-PAK1 (Ser144) + PAK3 (Ser154)       磷酸化三磷酸腺苷依賴(lài)解旋酶ddx5抗體 phospho-DDX5 (Tyr593)大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)elisa檢測(cè)試劑盒       小鼠磷酸肌醇依賴(lài)性蛋白激酶1(PDPK1)elisa檢測(cè)試劑盒

人促甲狀腺素受體(TSHR)elisa分析檢測(cè)試劑盒       HumanTSHRELISAKit

冰凍切片磷酸化酶活性染色試劑盒       人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)elisa分析檢測(cè)試劑盒

人分泌性白細(xì)胞蛋白酶抑制因子(SLPI)elisa檢測(cè)試劑盒       調(diào)料谷比色法定量檢測(cè)試劑盒

豬賴(lài)氨酰氧化酶elisa檢測(cè)試劑盒       大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠抵抗素樣α(Retnla)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)       小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)elisa檢測(cè)試劑盒

HGC-27人胃癌細(xì)胞人鼻病毒(RV)抗體(IgA)elisa檢測(cè)試劑盒       組織磷脂酶D2（Phospholipase D2）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

植物過(guò)氧化氫酶2(CAT2/CAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒       CAT2/CAT ELISA kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。