細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產(chǎn)品名稱	Hs 695T人黑素瘤細(xì)胞	英文名稱	Hs 695T
產(chǎn)品貨號	AXB6320	培養(yǎng)條件
生長特性	貼壁生長	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	人	凍存條件	90% FBS + 10% DMSO
組織來源	皮膚	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

種屬來源；人

組織來源；皮膚

性別年齡；26 歲，白人男性

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞規(guī)格；1 X 106cells/T25或1 mL凍存管

培養(yǎng)條件；

凍存條件；90% FBS + 10% DMSO

傳代方法；1:3 傳代, 2-3 天傳 1 代

錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體       ANKRD17

IGF 蛋白共沉淀分析試劑盒       綿羊催產(chǎn)素(OT)elisa分析檢測試劑盒

Ran結(jié)合蛋白4抗體       Importin4

I型膠原前體蛋白1抗體       Pro-Alpha 1 type I collagen

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體  Anti-UNC93B       血漿谷氨酸羧肽酶抗體  Anti-PGCP

SOC培養(yǎng)基SOC Broth 250g       小鼠激肽釋放酶7(KLK7)elisa檢測試劑盒

CD79b重組兔單克隆抗體      CD79b

蛋白質(zhì)磷酸酶2A-B55抗體  Anti-PPP2R2B/PP2A-B55       超氧化物歧化酶3抗體  Anti-SOD3鋅指蛋白20D3抗體       ZA20D3

人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體IgM(HSVⅡ-Ab)elisa分析檢測試劑盒       HSVⅡ-AbELISAKit

Cy7標(biāo)記的羊抗人IgM       Goat Anti-Human IgM / Cy7

犬E選擇素(SELE)elisa分析檢測試劑盒       SELE ELISA kit

小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)elisa分析檢測試劑盒       NF-κBp65ELISAKit

猴肝炎病毒細(xì)胞的受體1/腎損傷分子1/KIM1(HAVCR1)elisa分析檢測試劑盒       HAVCR1 ELISA kit

Hs 695T人黑素瘤細(xì)胞人二氫嘧啶脫氫酶[NADP+](DPYD)elisa分析檢測試劑盒       HumanDihydropyrimidinedehydrogenase[NADP+](DPYD)ELISAkit

鴿子白蛋白(Albumin)elisa分析檢測試劑盒       Pigeon Albumin ELISA Kit

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。