細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產品名稱	HSF(SV40)人真皮成纖維細胞（原代細胞永生化）	英文名稱	HSF(SV40):HSFSV40
產品貨號	A01X774	培養(yǎng)條件
生長特性	貼壁生長	細胞形態(tài)	成纖維樣
產品種屬	人	凍存條件	詳見說明
組織來源	真皮組織	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

細胞特性

1） 來源：人真皮組織

2） 形態(tài)：成纖維細胞樣，貼壁生長

3） 含量：>1x10^6  細胞數(shù)

4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途：僅供科研使用。

口蹄疫病毒A型抗體       FMDV Polyprotein (3A protein)

轉運蛋白1抗體  Anti-Transportin 1       前纖維蛋白1抗體  Anti-Profilin 1

乙酰轉移酶9抗體       NAT9

1號染色體開放閱讀框187抗體       C1orf187/Draxin

血管內皮生長因子A  Anti-VEGF-A       骨巢蛋白抗體  Anti-Nanos3

磷酸化精子尾部結構蛋白抗體  Anti-phospho-ODF2(Ser796)       P物質抗體  Anti-Substance P

NPIPL2蛋白抗體      NPIPL2

DNA修復和重組蛋白RAD54B抗體  Anti-RAD54B       瞬時受體電位離子通道蛋白3抗體（M亞家族）  Anti-TRPM3人鉀離子通道蛋白抗體elisa分析檢測試劑盒       HumanVoltageGatedPotassiumChannelAntibodyELISAKit

HD域內含蛋白2抗體       HDDC2

大鼠雌二醇(E2)elisa分析檢測試劑盒       E2 ELISA Kit

大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)elisa分析檢測試劑盒       小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)elisa檢測試劑盒

人CD147分子(CD147)elisa檢測試劑盒       細胞基質金屬（MMP-9）捕獲檢測試劑盒

KIAA1310蛋白抗體       KIAA1310

HSF(SV40)人真皮成纖維細胞（原代細胞永生化）卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD6抗體       CHCHD6

綠視蛋白敏感CBBM抗體       Opn1mw

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。