細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

商品屬性：

產品名稱	JEG-3人絨毛膜癌細胞	英文名稱	JEG-3:JEG3
產品貨號	A01X798	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	貼壁細胞	細胞形態(tài)	上皮細胞樣
產品種屬	人	凍存條件	凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	胎盤病變；絨毛膜癌	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

生長培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

背景描述 JEG-3細胞是一株超三倍體人類細胞株。JEG-3細胞的典型染色體數為71，發(fā)生率為34%，多倍體率為2.6%。t(4;11)(p15;q13)，i(13q)，t(10p15q)，del(18)(q21)和6個其他標記在大多數細胞中常見，另有兩個標記在一些細胞中可見，在一個N14和兩個N22中可見大衛(wèi)星。N2、N5和N9有4個拷貝，而N7、N13、N18、N21和X為單拷貝，Q-帶檢測法可以檢測到單個Y染色體。

年齡（性別） 男

組織來源 胎盤病變；絨毛膜癌

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 其它腫瘤細胞

生物等級 1

倍增時間 ~24-36 hours

致瘤性 Yes, in nude mice; forms malignant tumor consistent with choriocarcinoma.

基因表達情況 human chorionic gonadotropin (hCG), human chorionic somatomammotropin (placental lactogen); progesterone

保藏機構 ATCC; HTB-36 BCRC; 60428 BCRJ; 0123 DSMZ; ACC-463 ECACC; 92120308

SARA蛋白抗體 SARA       SMCR7蛋白抗體 SMCR7

Ⅰ型補體受體重組兔單克隆抗體 CD35       AF680標記的環(huán)氧合酶2/前列腺素內過氧化物合成酶2抗體 Cyclooxygenase 2, Alexa Fluor 680 conjugated

吞噬細胞運動蛋白2抗體 ELMO2       維甲酸受體RAR α/RAR α抗體 RAR alpha

異染色質蛋白1磷酸化抗體（果蠅） phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)       原癌基因WIP1抗體 PPM1D

G蛋白α抑制蛋白1抗體 GNAI2/G protein alpha inhibitor 1       G蛋白偶聯受體GPR157蛋白抗體 GPR157

減數分裂缺陷蛋白1抗體 MEI-1       金屬蛋白酶相關蛋白1抗體 OMA1

泛素蛋白連接酶重組兔單克隆抗體 Fbx32      肺癌和食道癌缺失基因1抗體 DLEC1

腦特異性跨膜蛋白抗體 NETO2       嘌呤嘧啶核酸內切酶2抗體 APEX2（PROTEASE）定性檢測試劑盒       兔p53(p53)elisa檢測試劑盒

人二胺氧化酶(DAO)elisa分析檢測試劑盒       DAOELISAKit

純化線粒體總RNA萃取試劑盒       大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)elisa檢測試劑盒

NZCYM培養(yǎng)基NZCYM Broth 100g       通用型鈉離子（Na）濃度化學比色法定量檢測試劑盒

小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)elisa檢測試劑盒       大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)elisa檢測試劑盒

植物賴（lysine）含量熒光定量檢測試劑盒       小鼠Smad7 elisa分析檢測試劑盒

JEG-3人絨毛膜癌細胞大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP1)elisa檢測試劑盒       HISTONE H3蛋白共沉淀分析試劑盒

猴補體片斷3b(C3b)elisa分析檢測試劑盒       C3b ELISA kit

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。