
商品屬性:
產(chǎn)品名稱
英文名稱
kyse30:kyse30
產(chǎn)品貨號
A01X816
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%,
生長特性
貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣,帶有長的偽足
產(chǎn)品種屬
人
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源
食管鱗狀上皮
用途
僅供科研研究實驗
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣,帶有長的偽足
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)方案A(默認(rèn))
生長培養(yǎng)基:
RPMI-1640+Ham's F-12+2mM L-Glutamine+10% FBS+1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相:空氣,95%;CO2,5%, 溫度:37℃
推薦傳代比例 1:3-1:5
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 Derived from well
differentiated invasive esophageal squamous cell carcinoma resected from middle
intra-thoracic esophagus of a 64-year-old Japanese man prior to treatment; cell
line Established from tumor cells heterotransplanted into athymic mice;
described in the literature to be heterotransplantable in athymic mice and to
carry p53 mutation and amplification of cERB B, MYC and CYCLIN D1
年齡(性別) 女性;64歲
組織來源 食管鱗狀上皮
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 食管癌細(xì)胞
生物等級 BSL-1
倍增時間 ~20-30 hours
保藏機(jī)構(gòu) DSMZ; ACC-351 ECACC; 94072011 JCRB; JCRB0188

細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液(0.25%Trypsin)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1:3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟:

(2)吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次,搖勻后棄掉。
(3)加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
(4)培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化,3min左右拿出,用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量,發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落,加入2倍量的胰蛋白酶中止消化,并吹打均勻,避免消化過度。
(5)細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi),1000rpm/min離心3~5min。
(6)吸棄上清,加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,吹打細(xì)胞使其均勻分散。
(7)吸棄細(xì)胞懸液,選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻,放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
(8)根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
(9)細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品:

8號染色體開放閱讀框K29抗體 C8orfK29
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)OXY235品系基因檢測試劑盒 小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)elisa分析檢測試劑盒
IQCE蛋白抗體 IQCE
癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體 Rab25
泛素蛋白連接酶G1抗體 Anti-Ube2G1/UBC7 腫瘤抑制基因p53抗體 Anti-p53 (FL-393)
大鼠游離睪酮(F-TESTO)elisa檢測試劑盒 載玻片細(xì)胞INSULIN 蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
IZUMO4蛋白抗體 IZUMO4
磷脂酸磷酸酶2結(jié)構(gòu)域3抗體 Anti-PPAPDC3 神經(jīng)生長相關(guān)蛋白SCG10抗體 Anti-STMN2/SCG10眼睛和頭發(fā)顏色相關(guān)蛋白FUZ抗體 FUZ/FUZZY
人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)elisa分析檢測試劑盒 HumanPIPELISAKit
PE-Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG H&L Donkey Anti-Goat IgG H&L / PE-Cy7
牛雄烯二酮(ASD)elisa分析檢測試劑盒 ASD ELISA Kit
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)elisa分析檢測試劑盒 MouseLeptospiraantibody(IgG)ELISAKit
倉鼠丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒 MDA ELISA kit
kyse30人食道癌細(xì)胞人凋亡相關(guān)半胱氨酸肽酶4(Casp4)elisa分析檢測試劑盒 Casp4ELISAKit
植物吲哚乙酸(IAA)elisa分析檢測試劑盒 IAA ELISA Kit